外源DNA直接导入法的大豆分子育种成效研究.pdfVIP

外源DNA直接导入法的大豆分子育种成效· 雷勃钧钱华李希臣刘昭军 (黑龙江省农业科学院生物技术研究中心 哈尔滨 1 50086) 摘要：本文以高产优质高蛋白大豆黑生101品种的育成为例，介绍了我国创立的经花粉管 通道转移总DNA的技术及分子育种效果，并就该技术与现有体外重组DNA技术进行对比， 拟提出我国目前转基因技术路线和产业化发展策略。 关键词：大豆，高蛋白，外源DNA直接导入，体外重组DNA，转基因作物 BREEDINGEFECTIVEⅣ匝THOD—DIED SOYBEAN LEI Xi-chenLIU un hua，LI Zhao-j Bo-jun，QIAN Research 1 AcademyofAgriculturalSciences，Harbin50086) (BiotechnologyCenter,Heilongiiang Abstract：Basedonthe of 101 anew with breedingHeisheng soybeanvarietyhi曲yield，good and describesthe of Total quilityhighprotein．Thepaper techniqueIntroduingExgenous Tube thatwasset inChina．Italso thismethodwith DNA(IETD)by up compares gene pollenpath andconventional of transformation engineering breedingmeth—ods．Developmentalstrategiesgene inChinaarediscussed． techniques words： Introduction protein，DIED(DivectExogenousDNA)，DNA Key Soybean，High recombinationin modified vitro．GMC(geneticallycrops)． 利用花粉管通道法进行遗传转化即外源DNA直接导入(DivectIntroduction Exogenous DNA为叙述方便，本文中简称为DIED)技术【lJ，将高蛋白野生大豆总DNA直接导入栽培 大豆，以转化受体早期胚胎细胞实现目的性状(高蛋白、抗逆性等)基因的转移，成功地育 成了第一个转化的高产、优质、高蛋白大豆品种黑生101(品系号为D89．9822)【21，现已进 入大面积推广，并获得一批高蛋白或大粒或抗病等转化品系和种质正在加以选择利用。现仅 以黑生10l育成为例说明该技术的分子育种效果。 1材料与方法 1．1材料： 供试受体为栽培大豆(6296．3)，供体为野生大豆(龙79．3433．1为黑龙江省收集的蛋 白含量50％以上特高蛋白材料)。 1．2方法： 采用氯仿一异戊醇一核糖核酸酶法，对供体进行总DNA的提取；在大豆自花受粉后 6-32h内，采用切柱头滴注法，将供体DNA直接导入受体；所获导入后代第一代按单粒调 查记录种植，第二代按单株调查种植，以后世代基本按常规育种程序进行田间种植和选择： ’。本项目经4i同阶段立项得以圆满完