性别鉴定遇性别控制修改后.pptVIP

性别鉴定与性别控制 一、性别控制定义 二、性别控制的意义 三、性别控制的方法 （一） 早期胚胎性别鉴定 （二） 晚期胚胎性别鉴定 （三） 精子分离方法 （四） 母畜受精环境的控制 （五） 鱼类、两栖类等低等动物的性别控制 一、性别控制定义 在正常情况下，自然界动物群体公、母性别比例基本上近于1:1，保持性别比例平衡是生物进化的结果。 性别控制(sex control，SC)指通过人为干预并按人们的愿望使雌性动物繁殖出所需性别后代的一种繁殖新技术。 畜牧生产中，肉、奶、蛋等重要经济性状在性别间有差异，有的是限性性状。 奶 牛 蛋 鸡 长毛兔：产毛量母兔优于公兔 二、性别控制的意义 目的是在动物出生前即用人工方法控制其性别，以改变后代的自然性别比例，进而按照人们的意愿进行特定性别的畜禽生产，显著提高畜牧业经济效益。 这对高效优质的发展畜牧业具有重要意义： 可使受性别限制的生产性状（如泌乳性状）和受性别影响的生产性状（如肉用、毛用性状等）能获得更大的经济效益； 可增强良种选育中的选择强度，加快遗传改良的进度； 可以排除畜群中有害基因或不理想的基因（如避免患有伴性遗传疾病后代的出生）等。 对人类来说可以避免怀孕一个与X相关隐性疾病的婴儿。对于平衡一个家庭后代的性比例也起到积极的作用。 三、性别控制的方法 主要在两个方面进行 受精前：通过体外对精子进行干预，分离X精子与Y精子，使在受精时便决定后代的性别； 受精后：通过对胚胎的性别进行鉴定从而获得所需性别的后代，又细分为早期胚胎性别鉴定和确定出生前的胎儿性别然后选择性流产两种方法。 控制受精环境 生产纯合性双倍体 孤雌生殖 显微注射已知性别精子 反复克隆已知性别的胚胎或体细胞等。 应用现代分子生物学技术对早期胚胎进行快速、准确的性别鉴定是可行的，已出生了后代。但由于早期胚胎性别鉴定需从胚胎上取下少量细胞，对胚胎有一定损害，经冷冻-解冻处理后仅有少量胚胎存活，导致胚胎移植的成功率下降，这就制约了提供预知性别家畜胚胎的商业化进程。 （一）早期胚胎性别鉴定 1、细胞遗传学方法 （核型分析） 操作过程:先取少量的胚胎细胞，在含有秋水仙素的培养液中培养，使细胞的有丝分裂停留在中期； 用低渗溶液使细胞膨胀，细胞膜破裂释放染色体，然后固定，用姬姆萨染色后在显微镜下观察。由于有丝分裂被阻滞在中期，故染色体缩短，形状规则，并有特异的带型。 通过核型分析来鉴定胚胎性别，寻找不能与X性染色体配对的Y染色体。 优缺点：准确率几乎是100%,但操作过程比较繁琐。 取胚胎上部分细胞的方法 吸取卵裂球（录像）：早期胚胎的卵裂球 胚胎切割（录像）：取囊胚的滋养层细胞 2、H-Y抗原测定法 依据H-Y抗原和抗体免疫反应的原理进行性别控制的免疫学方法。 Eirhwald和Silmser(1955)以近交系C57BL/6(B6)小鼠为材料，进行了相同和不同性别间皮肤移植实验，发现将雄性皮植片移植给雄性、雌性皮植片移植给雌性，以及将雌性皮植片移植给雄性，均不发生排斥反应。惟独将雄性皮植片移植给雌性时出现了排斥反应。 由于B6小鼠是高度近交的纯合小鼠，每一个体的遗传基础完全相同，按说不应发生排斥反应，因而认为这种雌性对雄性的排斥反应是由于雄鼠皮植片具有一种雄性特有的细胞表面成分所致。 这说明一定是由于雄性细胞有特殊要求，雌性不能提供或由于雄性动物细胞表面有一种特殊成分，对雌鼠来说是一种外来之物。 即存在一种雄性特异移植抗原，这种成分被称为雄性特异性次要组织相容性Y抗原 (male specific minor histicmpattbility-Y antigen),简称H-Y抗原。 在哺乳动物，已发现小鼠、大鼠、兔、牛、绵羊精子上H-Y抗原的表达。 此外，在小鼠、大鼠、兔、猪、绵羊、山羊和马的早期胚胎上亦发现H-Y抗原的存在，并以此进行了植前胚的性别鉴定。 通过测定胚胎上H-Y抗原的存在与否就能对胚胎的性别做出鉴定。 胚胎的细胞毒性分析 胚胎H-Y抗原的间接免疫荧光分析法 囊胚形成抑制法。 1.胚胎细胞毒性分析 在补体存在的情况下，H-Y抗体与雄性胚胎结合，并使其中的卵裂球发生溶解，使卵裂球呈献不规则的形状。 2.间接免疫荧光分析法 染色后显荧光者为H-Y+胚胎。 3.囊胚形成抑制法 利用H-Y抗体与桑椹胚共孵育，抑制雄性胚胎的囊胚腔的形成。 3、SRY基因探针法 20世纪90年代初英国学者发现存在于Y染色体短臂上决定雄性的SRY基因。 荧光原位杂交技术(FISH)根据SRY基因序列合成特异性的探针，用荧光标记，与制备的早期胚胎细胞杂交，如果具有SRY序列则可以检测到荧光，判断为雄性，反之为雌性。 荧光原位杂交（FISH）： 应用荧光素标记的DNA探针与标本进行原位杂交后，使杂交区域发出荧光。 优点：快速、安全