教学材料-实验指导精选.pdf

食品微生物学实验指导 食品微生物学科组 2007 ．3 1 实 验 须 知 食品(发酵)微生物学实验的目的是：训练学生掌握最基本的操作技能；了解 微生物学的基本知识；加深对微生物学基本理论的理解。通过实验，培养学生观 察、思考、分析解决实际问题的能力；实事求是、严肃认真的科学态度和勤俭节 约、爱护公物的良好作风。 为了上好微生物学实验课，并保证安全，实验时须注意如下事项： 1 ．为了保证实验室的整洁和实验的顺利进行，非必要的物品和书包，不得 带入室内，实验时不得高声谈话和随意走动。 2 ．每次实验前要对实验内容进行充分预习，了解实验的目的、原理和方法， 做到心中有数，并作合理安排。 3 ．实验中要认真观察，及时做好实验记录。对于当时不能得到结果而需要 连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。 4 ．实验操作应严格按操作规程进行，万一遇有带菌物品洒漏、皮肤破伤或 菌液吸入口中等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。 5 ．实验过程中，切勿使乙醚、丙酮、酒精等易燃药品接近火源，如遇火险， 应先关掉火源，再用湿布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火器。 6 ．凡实验用过的菌种以及带有活菌的各种器皿，应先经高压灭菌后才能洗 涤。制片上的活菌标本应先浸泡于 3 ％来苏儿溶液或 5 ％石炭酸溶液中，半小时 以后再行洗刷。如系芽孢杆菌或有孢子的菌，则应适当延长浸泡时间。 7 ．实验中需进行培养的材料，应注明组别、名称及处理方法。 2 目 录 实验一 ……………………………………………乳酸菌的分离及初步鉴定 实验二 ……………………………………………厌氧菌的培养和滚管技术 实验三 ……………………………………………食品中霉菌及酵母菌的检测 （补充血细胞计数板计数法） 实验四 ……………………………………………食品中细菌总数的测定 实验五 ……………………………………………食品中大肠菌群的检验 实验六 ……………………………………………食品中金黄色葡萄球菌的检验 附录一 ……………………………………………常用染色液的配制 附录二 ……………………………………………培养基配方 附录三 ……………………………………………大肠菌群最可能数(MPN)检索表 3 实验一 发酵食品中乳酸杆菌的分离和初步鉴别 一、实验目的 学习与掌握食品中乳酸杆菌的常规分离方法并作初步的鉴别。 二、实验原理 乳酸杆菌大多数是发酵工业尤其是食品工业上常用的菌种。乳酸杆菌为厌氧和微好氧 菌，革兰氏染色阳性，表面生菌落较小，可以发酵葡萄糖或乳糖产生乳酸，并将培养基中的 碳酸钙溶解。有些菌如保加利亚乳杆菌在 15℃时不生长，在45 ℃甚至 50℃时生长，最适生 长温度为 40—43 ℃；而有些菌如植物乳杆菌在 15℃生长，45 ℃时一般不生长，最适生长温 度为 30℃左右。通常我们利用这些特点可作初步的鉴别。 三、实验材料和仪器 1. 酸牛奶 1 瓶，泡菜汁 1 管，9ml生理盐水 5 管， MRS培养基 100ml，灭菌CaCO 3 克（用 3 纸包）。 2. 40 ℃和 30℃恒温箱，振荡器，超净工作台，1ml 无菌吸管 5 支，培养皿 6 套，革兰氏染 色液 1 套， 四、实验方法与步骤： 1. 将酸奶和泡菜汁分别制成 10 倍系列稀释液。 2. 取适当稀释度之稀释液 0 ．5 或 1ml 于培养皿中。 3. 以无菌操作把无菌CaCO3 加入融化了的MRS培养基中，于自来水中迅速冷却培养基至 45 ℃左右。轻摇使CaCO3混均，但不得产生气泡。立即倒入培养皿