固定化β葡萄糖苷酶制备龙胆低聚糖工艺研讨.pdf

瞎压料技大学 论文题目： 固定化伊葡萄糖苷酶制备龙胆低聚糖工艺研究 学科门类：工 学 ． 一级学科：化学工程与技术 培养单位：生命科学与工程学院 硕士生：王钏 导师：齐香君教授 201 2年5月 STUDIESoNTHE PREPARATIoN TECHNoLoGYoF S WITH AThesisSubmitted to Shaanxi ofScience University and Technology in PartialFulfillmentof the forthe of RequirementDegree Masterof Science Enaineering 一————————————，．，●_■●■■■■●_____________●■● Thesis Supervisor：Professor Xi垒卫2：j丛塾Qi 2 May，201 固定化伊葡萄糖苷酶制备龙胆低聚糖工艺研究 摘要 有显著增殖肠内有益菌、调节肠内菌群平衡和改善通便效果等生理功能。为 了降低龙胆低聚糖的生产成本，为其工业化生产提供技术参数，本文研究了 固定化伊葡萄糖苷酶(IBGL)制备龙胆低聚糖的工艺，通过葡聚糖凝胶柱 层析分离得到了目的物，并采用电喷雾质谱和核磁共振氢谱对其进行了鉴 定。主要研究结果如下： 1．BGL的制备工艺：黑曲霉固态发酵，按料液比1：10，自然环境温度 步盐析法纯化BGL，纯化倍数为1．6倍。 能力约为BGL的3．50倍。 5．产物龙胆低聚糖的分离鉴定： 1)分离条件：葡聚糖Shephadex 份I为葡萄糖，组份II可能为生成的龙胆二糖。 结合质谱、核磁共振氢谱结果，判定组份II为龙胆二糖。 6．酶法合成龙胆低聚糖体系中残留底物葡萄糖量的方法学研究：为定 量测定酶法合成龙胆低聚糖得率，本文采用葡萄糖试剂盒法，通过测定转化 后残留底物葡萄糖的量，间接测定龙胆低聚糖得率。该法在2小时内测定酶 法合成龙胆低聚糖体系中葡萄糖量的结果稳定(RSD=0．81％)，重复性好 能显著降低龙胆低聚糖的生产成本。 关键词：龙胆低聚糖，伊葡萄糖苷酶，固定化，葡聚糖凝胶层析，龙胆二糖 Ⅱ oN STUDIESPREPARATIoN oF