MTT法测定大肠杆菌活菌数实验研究 Experimental study on the application of MTT colorimetric method in counting live Escherichia coli.pdfVIP

第 31卷第 12期 环 境 科 学 学 报 Vo1．31．No．12 2011年 12月 ActaScientiaeCircumstantiae Dec．．2011 汪志荣，高琼，马传鑫，等．2011．MTT法测定大肠杆菌活菌数实验研究 [J]．环境科学学报 ，31(12)：2642—2650 WangzR，GaoQ，MaCX，eta1．2011．ExperimentalstudyontheapplicationofMTTcolorimetricmethodincountingliveEscherichiacoli[J]．Acta ScientiaeCireumstantiae，31(12)：2642-2650 MTT法测定大肠杆菌活菌数实验研究 汪志荣 ，高琼，马传鑫，李燕妮 天津理工大学环境科学与安全工程学院，天津 300384 收稿 日期 ：2011—02—25 修回 日期 ：2011—03-27 录用 日期 ：2011-04—12 摘要：实验分析 MTT比色法 中的工作波长、反应时间、MTT用量、菌龄、二 甲基亚砜 (DMSO)等因素对大肠杆菌活细菌计数的影响．同时，通过 与平板计数对 比，确定了MTT细菌计数的可行性．结果表明，当细菌数在 10 ～10 cell·mL 范围内时，双波长 MTT法可用于检测大肠杆菌的 活菌数量，最佳反应时间为60rain，MTT溶液用量200IxL，溶解剂 DMSO用量 1mL，且该方法对菌龄不敏感．OD5l0—69o值与细菌浓度 C呈 良好 的正向线性关系，其可决系数在 0．99以上． 关键词：MTT；双波长测定；大肠杆菌；活菌计数 文章编号 ：0253—2468(2011)12-2642-09 中图分类号：X172 文献标识码 ：A Experimentalstudyon theapplication ofM TT colorimetricmethodin counting liveEscherichiacoli WANGZhirong ，GAOQiong，MAChuanxin，LIYanni SchoolofEnvironmentalScienceandSafetyEngineering，TianjinUniversityofTechnology，Tianjin300384 Received25February2011； receivedinrevisedform 27March2011； accepted12April2011 Abstract：Experimentalstudieswere conducted on the influencesofworkingwavelength，reaction rangeofmicrobialcellnumber，reaction time， concentrationofMTT，cellageofEscherichiacoli(E．coli)，DMSOintheMTTcolorimetricmethod(MTTmethod)，etc ofrdeterminingliveE．coli． Comparedwithdilution—platemethod，theMTTmethodwasaviablemethodforcountingliveE．coli，providedthenumberofbacteriawasintherange 10 cell·mL～ ～10 cell·mL ‘。．Thebestworkingparameterswerereaction time60minutes，MTT200 LandDMSO 1mL．Themethodwasinsensitive tocellageofE．coli．ThecorrelationbetweenthevaluesofOD5lo 690andthemicrobialcellnumberwasabove0．99． Keywords：MTT；dualwavelengthmeasurement；Escherichiacoli；livegerm counting 探索一种能克服上述 问题的活菌计数法． 1 引言 (Introduction)