任何溶质在两相中的分配系数均为1.PPT

新型分离技术 西南科技大学 * 双水相体系是怎样形成的？ 其分配机理是什么？ 什么双水相萃取？ 双水相体系的相图？ 双水相萃取的原理是什么？ 特点是什么？ 影响双水相萃取体系的因 素有哪些？ 其应用范围是什么？ 2.3 双水相萃取 2.3.1双水相体系的形 成与分配 2.3.2双水相萃取分离的原理 2.3.3双水相萃取体系的影响因素 2.3.4双水相萃取操作及特点 2.3.5双水相萃取的应用 掌握： 了解： 重点： 难点： 本节要点及学习要求 双水相体系的形成与分配机理 双水相萃取分离的原理 双水相体系中的分配平衡：静电作用、疏水作用。 聚合物的不相溶性、系线、双节线、临界点。 影响物质分配平衡的因素： 双水相中聚合物组成的影响； 双水相系统物理化学性质的影响； 盐和缓冲液的影响；温度的影响。 双水相系统的应用。 双水相体系的形成与分配机理， 双水相萃取分离的原理和特点。 双水相体系的形成与分配机理。 双水相萃取技术 (two-aqueous phase extraction,ATPS) 又称水溶液两相分配技术 (1)概述： 基因工程产品如蛋白质和酶的特点: 传统的溶剂萃取法并不适合。反胶束的办法可克服这些问题，但存在大量使用有机相和相的分离问题。 基因工程产品的商业化迫切需要开发适合大规模生产的、经济简便的、快速高效的分离纯化技术。 2.3.1 双水相体系的形成与分配 活性和功能对pH值、温度和离子强度等特别敏感； 在有机溶剂中的溶解度低并且会变性。 技术诞生 1896年Bei jerinck观察到 先得到一浑浊不透明溶液，随后分为两相, 水相也可以分为两相，即双水相系统 ? 将水溶性的酶、蛋白质等生物活性物质从一个水相转移到另一个水相中__双水相萃取. 开始于本世纪70年代，现已应用到酶、核酸、生长激素、病毒等分离提纯。近年来出现的引人注目、极有前途的新型分离技术。 明胶-琼脂水溶液混合 明胶-淀粉水溶液混合 2.3.1 双水相体系的形成与分配 (2)双水相体系 双水相 在一定浓度范围 密度不同两相 两相均含有 较多的水 明胶-琼脂水溶液混合 明胶-淀粉水溶液混合 葡聚糖-甲基纤维素 亲水性高分 子聚合物 水 水溶液 2.3.1 双水相体系的形成与分配 向水相中加入高分子化合物PEG/葡聚糖或盐，在一定组成范围内，可以形成密度不同的两相。 轻相富含高分子化合物PEG， 重相富含盐或高分子化合物Dx葡聚糖。 举 例 2.3.1 双水相体系的形成与分配 葡聚糖-甲基纤维素钠两相体系 2.3.1 双水相体系的形成与分配 0.39% 葡聚糖 0.65% 甲基纤维素钠 98.96% 水 1.58% 葡聚糖 0.15% 甲基纤维素钠 98.27% 水 磷酸钾、硫酸铵 硫酸钠、硫酸镁 聚乙二醇 羧甲基甲基纤钠盐 羧甲基葡聚糖钠盐 甲基纤维素 羧基甲基葡聚糖钠盐 聚丙烯乙二醇 硫酸葡聚糖钠盐 聚乙烯醇、 Dex 聚乙二醇（ PEG） 聚乙二醇、聚乙烯醇 葡聚糖（Dex） 羟丙基葡聚糖 聚丙二醇 几种典型的双水相系统 2.3.1 双水相体系的形成与分配 各 种 双 水 相 体 系 2.3.1 双水相体系的形成与分配 葡聚糖 羟丙基葡聚糖 甲基纤维素 葡聚糖 羟丙基葡聚糖 硫酸镁 硫酸铵 硫酸钠 甲酸钠 酒石酸钾钠 聚乙二醇 甲基纤维素 聚乙烯醇 或 聚乙烯吡咯烷酮 聚蔗糖 葡聚糖 聚乙烯吡咯烷酮 磷酸钾 聚丙二醇 甲氧基聚乙二醇 聚乙二醇 聚乙烯吡咯烷酮 聚乙烯醇 聚乙二醇 葡聚糖 葡聚糖 聚蔗糖 羟丙基葡聚糖 聚乙烯吡咯烷酮 葡聚糖 羟丙基葡聚糖 聚乙烯醇 聚乙二醇 葡聚糖 乙基羟乙基纤维素 甲基聚丙二醇 聚丙二醇 聚合物2或盐 聚合物1 聚合物2或盐 聚合物1 (3)双水相体系的类型 双聚合物体系 常用PEG/Dx 聚合物与无机盐体系 如PEG/磷酸钾 表面活性剂-表面活性剂 亲和配基-高聚物, 亲和双水相萃取 2.3.1 双水相体系的形成与分配 双聚合物体系 聚合物/盐体系 活性损失 小 大 盐浓度 低 高 成本 高 低 粘度 大 小 环境污染 无 废水处理困难 其它 分相困难 界面吸附多 比