CIK对Lewis肺癌小鼠几种主要细胞因子水平影响的实验研讨.pdfVIP

摘 要 肿瘤是严重危害人类健康的重要疾病之一，经过二十多年对肿瘤 病人的过继免疫治疗的尝试，成功的过继免疫治疗的主要障碍是寻找 合适的细胞毒细胞。肿瘤过继免疫治疗中的TIL,LAK/IL-2疗法的临 床应用取得了令人瞩目的疗效，但LAK,TIL等细胞治疗尚有许多局 限或不足之处。本文探讨了外周血单个核细胞在体外经过多种细胞因 子共同诱导的杀伤细胞 (CIK)，具有杀伤Lewis肺癌细胞的抗瘤活性 和活化免疫细胞分泌细胞因子，增强机体的免疫功能，从而杀伤Lewis 肺癌细胞。 从正常人外周血分离出单个核细胞，制成细胞悬液进行培养，于 第0天加入Y-干扰素，培养24h后加入工L-2、工L-1、抗CD3单抗， 以后每3d更换新鲜培养液和补加IL-2，并调整细胞浓度至1X100/ml, 这样制备的细胞称为CIK细胞。细胞表型分析表明:CIK细胞是一类以 CD3`CD56为主要表型的非TCR和非MHC限制的高效细胞毒细胞。经过 2周左右的培养细胞数量最多，杀瘤活性最强。动物试验表明，CIK 比 LAK具有更强的抑制Lewis肺癌的作用;此外，本文检测了Lewis肺 癌小鼠脾细胞培养上清液中的Thl型细胞因子(IL-2,IFN-r,TNF-a), Th2型细胞因子 ((IL-4)治疗前后的含量，并与LAK细胞进行了比较。 CIK治疗后Thl型细胞因子 ((IL-2、IFN-r,TNF-a)的含量明显高于 治疗前，而Th2型细胞因子 ((TL-4)治疗后的水平低于治疗前。表明 荷瘤鼠的免疫细胞呈现Th2型优势状态，CIK治疗对于Lewis肺癌小 鼠的Thl/Th2的状态有良好的调节作用，使Lewis肺癌鼠的Th2型优 势免疫反应向Thl型逆转，有利于对肿瘤细胞的免疫监视。 关 键 词:CIK 细胞因子 Lewis肺癌 StudiesonCytotoxicityagainstTumorCellsofCIK(Abstract) Tumorisoneofthemostseriousdiseasesthatdogreatharmstohumanhealth.Over thepasttwodecades,attemptshavebeenmadetodevelopimmunotherapyforpatients withtumor,Butasignificantobstacletothedevelopmentofsuccessfuladoptive immunotherapyhasbeentheavailabiliytofappropriatecytotoxiccells.Theadoptive transferofTIL.LAKcells,incombinationwithIL-2,hasshownpromiseintumor immunotherapy.Butimmunologiceffectorcellssuchastumor-infiltratinglymphocytes (TILs),lymphokineactivatedkillercell(LAK),Pooreffectorcellsproliferationand marginalanti-tumoractiviyt limitattemptstouseimmunotherapyCIKcellsmay provideapotenttoolforusinadoptiveimmunotherapy Inthisstudy,wesuccessfullyinducedCIKcells.CIKcellsgeneratedinvitrofrom peripheralbloodmononuclearcells伊BMC)ofhealthydonorsbyadditionof IL-2,IL-1,IFN-r,CD3McAb,arehighlyefficientcytotoxiceffectorcellswiththe CD3+CD56+phenotype.CIKcellshavecharacterizedtheexvivoexpansionupto 1000-foldandinducenon-majorhistocompatibilitycomplex-restrictedlysisoftumor cellsanddemonstratecytolyticactiviytsuperiortoLAKwithouttherequirementof IL-2treatmentinvivo.Invivoanimalexperiments,CIK