芒果叶黄酮提取.docVIP

攀枝花学院实验报告 实验目的：用乙醇回流提取法，提取芒果叶中总的黄酮，并在料液比，乙醇浓度，浸取时间一定的条件下，建立时间的温度梯度，找到最佳浸取温度。在此过程中，学会设计实验，并做出可行性报告，学会使用分光光度计，并绘制芦丁标准曲线。 实验仪器、药品、器材：粉碎机1台，2个100ml的容量瓶，1个10ml的容量瓶，80目筛，2个100ml的烧杯，4个50ml的圆底烧瓶，1个50ml的量筒，1支1ml的移液管，1支5ml的移液管，恒温水浴摇床、分光光度计。 药品：80%的乙醇溶液、5%亚硝酸钠溶液、4%氢氧化钠溶液、10%硝酸铝溶液、10mg 实验原理（装置）：黄酮类为有机物，具有相似相容的性质，本实验中，用乙醇有机溶液与芒果叶料浸取黄酮类物质。利用相似相溶原理，通过系统中不同组分在溶剂中有不同的溶解度来分离混合物的单元操作，由于所提取的组分的不同，此次为浸提法（固—液萃取法）提取。 实验步骤： 芒果叶粉末的制备 采集同一品种适量的芒果叶，先用自来水洗净，再用蒸馏水冲洗，放入烘箱中烤干，把温度设置在60?C，再用粉碎机粉碎，用80目筛过筛，即制的芒果叶粉末。 2、配制80%的乙醇溶液。3、准确称取4个2g的粉末，放如4个圆底烧瓶中，再用量筒量取40ml的80%乙醇溶液倒入50ml圆底烧瓶中，分别在贴上50?C、60?C、70?C、80?C的标签，放入恒温水浴摇床上，按标签调定相应温度，作用90min。提取完毕，用与提取剂的质量分数相同的乙醇溶液（80%）反复洗涤圆底烧瓶，将其倒入100ml的容量瓶中定容。然后精确吸取0.5ml提取液置于10ml的容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加入10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用80%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12min，在510nm处测吸光度。每个温度重复3次。数据记录与表2 提取工艺 不变因素：料液比：1：20（g/ml）；?C；⑤乙醇浓度80% 标准曲线的绘制 芦丁标准液的配制：10mg于100ml容量瓶中，用乙醇溶解并定容至刻度，即得0.1mg/ml的芦丁标准溶液。 分别精密吸取芦丁对照液（0.1mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加入10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用80%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置，12min，以试剂做空白，在510nm处测吸光度。 5%亚硝酸钠溶液的配制：准确称取5g亚硝酸钠，再加入95ml（95g）的蒸馏水，搅拌溶解即可。 4%氢氧化钠溶液的配制：准确称取4g氢氧化钠，再加入94ml（94g）的蒸馏水，搅拌溶解即可。 10%硝酸铝溶液的配制：准确称取10g硝酸铝，再加入90ml（90g）的蒸馏水，搅拌溶解即可。数据填入表1 表1分光光度计测定芦丁的吸光度 X(mg/ml) 0.00 0.005 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 吸光度 表2不同提取温度对芒果叶黄酮的提取结果 提取温度（?C） 50 60 70 80 吸光度1 吸光度2 吸光度3 平均值 附页 分光光度计的使用方法 1．使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。仪器在使用前先检查一下，放大器暗盒的硅胶干燥筒（在仪器的左侧），如受潮变色，应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶，烘干后再用。?????2．将灵敏度旋钮调置“1”档（放大倍率最小）。? ????3．开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至测试用波长。仪器预热20分钟。? ????4．打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0”。? ????5．如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能置低倍率档使用，这样仪器将有更高的稳定性。但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。? ????6．预热后，按(4)连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。?????7．吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”