抗癌活性肽对胆囊癌细胞GBCSD的作用及机制研究.pdfVIP

第38卷增刊 解 剖 学 报 V01．38，Sup ACTAANATOMICASINlCA 2007 2007钲7fl July 抗癌活性肽对胆囊癌细胞’GBC-SD的 作用及机制 苏秀兰’ 师迎旭 崔宏伟 苏丽娅 苏依拉其木格 郭春芳 (内蒙古医学院临床医学研究中心附属医院中心研究室，呼和浩特010059) biology [摘要】 目的探讨抗癌活性肽(anticander 方法 实验分为3组，包括未加药组、正常肽组(normal 分别以MTT法、RT．PCR、Western 平．探讨它们之间的联系与作用机理。 结果1．随着抗癌活性肽浓度的递增、以及作用时间的延长，胆囊癌细胞GBC．SD的 相同；P27及C．myc的mRNA表达水平随着药物浓度的增加表达量增高；而对照肽则随着药物浓度的增加表达量降低。结 论 抗癌活性肽具有抑制胆囊癌细胞GBC．SD增殖分化的作用，其抗癌机制与调控肿瘤细胞凋亡相关基因表达相关。 [关键词]胆囊癌；活性肽；Westernblotting [中图分类号】 R978．16[文献标识码]A[文章编号]0529—1356(2007)SO一39 胆囊癌约占全部癌肿的0．8％一1．2％，我国胆 gcatcttcaaacc-3’。ACBP—S由本室提取制备。 囊癌发生率在消化系统肿瘤中占第6位，其高发年 2．方法 龄为50～70岁，女性多发于男性2—3倍，是目前预 MYI检测：将处于对数生长期的GBC—SD细胞 后较差的消化道肿瘤之一。如何提高胆囊癌的治疗 以0．25％的胰酶消化，并进行细胞计数，按每孑L约 效果是目前所面临的重要问题。ACBP—S是一种从动6000个细胞铺96孔板。在细胞生长24h后，加入 物体内诱导产生的低分子生物活性肽，具有较好的抑 ACBP—S，浓度为25 制胃癌、白血病．鼻咽癌等肿瘤细胞增殖分化的作用。 抗癌活性肽是否对胆道系统肿瘤也具有抑制作用以 的作用。 及其抗GBC．SD机制是本研究主要探讨的问题。 RT～PCR：将处于对数生长期的GBC．SD细胞用 0．25％的胰酶消化，并进行细胞计数，按每孑L10万 材料和方法 个细胞铺6孔板。在细胞生长24h后，加入ACBP—S 1．材料 GBC—SD购于山东大学；Mr兀．为Sigma分装。总RNA，测RNA浓度并对所提取的RNA进行琼脂 TRlzol、DNAMarker(DL2000)及Ex糖电泳检测RNA的完整性；进行反转录后，通过 Tag为TaKaRa 公司产品，ReverseTranscriptase为Promega公司产 品。所用引物由TaKaRa公司合成。引物序列：P27 F57．atgtcaaac甜gcgagt昏c-3’；R5’一tctgtagtagaactcgggcaa一 56℃；p2l62℃；p27620c；C—myc64℃；CyclinDl F 3’，P21 5’一cggcgtttggagt— 5’一ggggacagcagaggaagac一3’；R 64℃；Bax60℃；Actin56 F gOaga一3’，CyclinDl5’一gaacaaacagalcatccgcaa-3’；R 环；72。C延伸10rain。电泳后分析数据。 F 5’一cccttctggtatcaaaatgc-3’。C—m