抗附红细胞体有效药物的筛选研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集 原虫部分 抗附红细胞体有效药物的筛选 郑海红姚宝安1赵俊龙周艳琴冯汉利付媛王金苹刘琴袁建丰江涛 30070) (华中农业大学动物医学院武汉4 摘要： 以PCR检测附红细胞体呈现阳性且检染虫率达90％以上的猪血为研究对象，选择 市场上几种对附红细胞体敏感的药物(血虫净，附红净，庆大霉素，博士914，土霉素，三毒清， 红日链914，附红120，红弓链克，鸟金土霉素)和对支原体敏感的恩诺沙星，对立克次氏体敏感 的红霉素，采用两种方法进行体外药效试验。结果两种方法所筛选的有效药物基本吻合。其中附 红净对附红细胞体的作用效果最明显，而庆大霉素对附红细胞体基本无效，其他药物对附红细胞 体的治疗也有一定的疗效。 关键词：附红细胞体；药物作用 附红细胞体病是由血液寄生生物一附红细胞体引起，以贫血、黄疽、发热为主要特征的人畜 共患疾病。该病呈现全球性流行。国内外曾有人称之为黄疸性贫血病，类边虫病、赤兽体病和红 皮病。1982年，许耀成等首次在江苏南部红皮病血液中查到了猪附红细胞体，1994年就已在13 个省市发现此病。猪的附红细胞体不仅导致畜产品质量和产量的降低，还导致怀孕母猪出现受胎 率下降或发生流产、死胎等现象。更严重的是得了附红细胞体病的猪的免疫机能大大下降，为其 它病原体的传入打开了绿色通道。总之。附红细胞体病已经给养猪业造成了巨大的经济损失。 由于附红细胞体疫苗还没有成功面市，目前治疗该病还是主要靠药物。由于目前对于附红细 胞体的分类仍存在着争议，也没有对药物进行系统的有效性研究，因此，临床上以经验用药居多。 市场上声称对该病有效的药物也很多，但有真正意义上的实验室数据能说明其疗效的不多，这为 畜主在治疗该病时选择药物带来困惑，导致临床上滥用抗菌药，造成畜禽机体内药物残留。 本试验即选择一些报道过的对附红细胞体敏感的药物，本试验根据文献。“1采用两种方法对这 些药物进行初步的有效性研究，为进一步研究这些药物对附红细胞体的作用机理打下基础，并为 兽医临床选用药物提供依据和指导。 1．材料和方法 1 1材料 1．1．1附红细胞体来源 健康长白猪两头，摘除脾脏并人工感染附红细胞体使其出现附红细胞体感染的临床症状，用 肝素钠作为抗凝剂，通过前腔静脉无菌采集其血液。 1．1．2药物： 血虫净(生产批兰州正丰制药有限公司)，附红净(华中农业大学动物医学院 产批号030805，黑龙江正龙动物药业有限公司)，成份为复方磺胺对甲嘧啶；硫酸庆大霉素注射 盐城市兴牧动物药业有限公司)，主要成份为盐酸土霉素；恩诺沙星(华中农业大学兽医院惠赠)； hzaueducn 博士生导师，Tel：02787280787，Emaih yaobaoan@mail 中国奢牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集 原虫部分 三毒清注射液(生产批湖南广安动物保健品有限公司)主要成份为磺胺间甲氧嘧啶 红弓链克复方磺胺间甲氧嘧啶注射液(生产批湖南省动物药厂)；乌金土霉素注射 液(生产批湖南省动物药厂)。各种药物均用生理盐水溶解稀释成应用液。 1．1．3应用培养基RPMIMedium1640：小牛血清(V=v)=60：40 1 1．4仪器设备 哈尔滨东联电子开发有限公司制造；光学显微镜：中国制造：微量移液器：芬兰制造。 1．2方法 1．2．1阳性红细胞筛选新鲜血液(抗凝血)吸取lul滴于载玻片上，加4．6ul生理盐水混匀， 加盖玻片，置高倍镜或油镜下观察(悬滴压片法)。红细胞失去球形立体形状，边缘不整而呈齿轮 状、星芒状、不规则多边形等扁平样形状。虫体聚集在红细胞周围或膜上，星球形，逗点形，杆 状或颗粒状[710在油镜下观察时，来回调微调发现虫体还具有一定的折光度判为阳性，并将镜检 为阳性的抗凝血送往华中农业大学动物医学院寄生虫实验室进行PCR诊断。选取PCR诊断为阳 的阳性红细胞移入到灭菌好的小瓶中，加等量的阿氏液，置4C冰箱保存备用。 1