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王建红马鬣藤谢宇锋凝傣华缪觉渡吴康睬壤艳杨吉成
苏娴大攀医学院细臌与分子生物举教研室 215007
f摘要】
真核细胞中获得表达,以迸一步研究rhIFN.入l的生物学特性。方法采用RT-PCR法从病
毒诱导的A549细憨mRNA中克隆hIFN.x
l基因,并重组予pcDNA3。IA真核表达载体上。
结果经双酶切和PCR鉴定及DNA序列分析,发现所克隆的基因与GenBank公布的序列一
致,并在COS.7细胞中获得到了有效瞬时表达,其rhIFN.入l表达产物具有抗病毒活性。结
论成功巍隆了hIFN-xl基毽,并成功她获得了鬓时表达。
关键词 入I-干扰累RT—PCR基因克隆COS一7细胞表达
地址:苏州市人民路48号 邮编:215007
InstantaneousandantiviralseffectionofHuman
Expression
GeneinCOS-7cells
琢N-入l
nU,Xie Wei-hua,Miao
WangJian-hong,MaYu-feng,Sheng ling-cheng,WuKang,ChengXiong-yan,
YangJi·cheng
ofcellandmolecular ofSuzhou
biological Medical
Department Research,University College,215007
Abstract Tocloneand hlFN-?Iandconstructthe
Objective express gene eukaryotic
vector the ofrh.I磷-?1.Me斑ods
expressingpcDNA3.IA一[FN·71。andstudybiologicalactivity
ThecDNA hIFN-?1was RT-PCRfromthetotalRNAextracted
fragment
encoding amplifiedby
fromvirus-inducedA549cells.Itwas
clonedintothe vector
eukaryoticexpressingpcDNA3。1A,o
ResultsWiththeidentificationofdouble and foundthat
enzymemap、PCR
sequencing,wegene
wehavecolonedisinaccordancewi氇the in rhIFN·?l
GenBank,The
genesequencepublished
was in COS-7ceils its haveanti·-virus
gene expressed transiently,andproducts
ThehIFN一?lWascloned and in
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