目前国内市场丙肝.ppt

目前国内市场丙肝 试剂质量分析 中国药品生物制品检定所 祁自柏 一. 样品来源及初筛 1.从有关血站及血液制品厂收集 2.从多个单位逐步收集2000多份小样在 我们实验室检测筛选 这些样品分别来自全国各地，约从几十万个供血员中进行筛选而得。根据我们初筛的结果及样品体积，确定对317份大样进行集中研究。 二、复核 对所选出的317份大样，用在国内注册的国外3家抗HCV EIA试剂及占国内抗HCV试剂市场50%以上的4家抗HCV EIA试剂进行检测，并对部分样品用抗HCV分段试剂进行检测，以了解其抗HCV抗体谱。并对部分样品进行HBsAg，抗HIV，抗HAV，特异性梅毒抗体，乙脑抗体等检测。 复核结果分析 1. 目前的国产抗HCV EIA试剂灵敏度不逊于国外试剂,在第3套和第4套抗HCV参考品研制中所发现的国产试剂对抗HCV NS3抗体检出力弱的问题,在这次考核中似乎不太明显,说明国产试剂质量有所提高。对某些稀释血浆所检出灵敏度还高于某些国外试剂。但对于个别弱阳性样品，国产试剂仍有漏检,其原因比较复杂，有待进一步研究分析。 2. 国产抗HCV EIA试剂特异性较差，存在较多的假阳性现象。检测时，灰区范围大，边缘样品重复性差。 三、确证 根据317份样品复检结果，对于可能被挑选入参考品的样品进行了确证。 1. RIBA 检测 2. HCV RNA检测 3. HCV基因型别测定，对部分分型结果 用核苷酸序列测定的方法进行了确证 4. CHIRON HCV TMA试剂检测 确证结果分析 1.国产抗HCV EIA试剂对所有RIBA 确定为阳性的样品均可检出。对于RIBA 单片段阳性的不确定样品，国内外试剂均有漏检。 2.国内外抗HCV EIA试剂对HCV不同基因型别的检出率似乎没有看出区别。 四、会同标定 根据样品复检及确证结果，考虑到样品的抗体谱，基因型别，地域代表性，尤其是国内试剂存在的问题，从317份样品中选出100份样品进行进一步研究和盲样会同标定。第一次标定要求各单位用目前批批检合格的试剂对该样品检测，并将结果反馈给我所。综合上述结果，我们拟定了65份样品进行了第二次标定，要求各单位对我们的检测结果进行复核，或对本单位的试剂进行改进。并将复核结果或改进后试剂的检测结果再次告知我所。 20家会同标定第一次反馈符合率 拟参考品 （-） （+） 样品数(份) 55 45 符合率(%) 65-100 71-98 8家会同标定第二次反馈符合率 会同标定结果分析 1.国内抗HCV试剂生产单位科研能力较弱，缺乏确证手段。除个别单位对个别数据进行了复核外，基本依赖于我所数据。 2.国内外试剂均存在漏检和假阳性现象，说明对丙肝病毒及丙肝试剂的研究有待进一步深入。 3.国产试剂存在较多的假阳性现象，在保证灵敏度的前提下，特异性问题也应当适当重视。 4. 国产抗HCV试剂经改进后,精密性,灵敏度,阳性样品符合率基本可达到要求,阴性样品符合率经进一步努力也有望达到参考品要求 。 五、参考品的组成及拟定标准 项 目 合 格 标 准 阴性参考品 30份 阴性符合率≥29/30 阳性参考品 30份 阳性符合率≥29/30 灵敏度参考品 4份 L1 阳性 L2 阳性 L3 阳性或阴性 L4 阴性 精密度参考品 1份 cv ≤15% (n=10) 特点1： 样品来源力求具有地域代表性及基因型代表性。 特点2： 阳性样品包括我国流行的主要的HCV基因型1b，2a。还包括1a，1a/1b，6a，1b/2a，3b。 特点3： 阳性样品力求涵盖各种抗-HCV抗体及各种抗-HCV抗体谱组合，含有抗-HCV强阳性样品，中等强度样品和弱阳性样品。如有的样品同时含有抗HCV核心，NS3, NS4和NS5抗体，有的样品含有其中两种或三种抗体组合，也有的样品只含有某一种抗体。包括抗HCV核心24份，抗HCV NS3 26份，抗HCV NS4 11 份，抗HCV NS5 5 份。并含有单独抗HCV核心抗体样品为6份，单独抗HCV NS3抗体样品为7份，用于控制对抗-HCV NS3和核心抗体的检出力度（该两种抗体为HCV感染人群中占绝