实验二部分清热药的体外抗菌实验.pptVIP

实验二 部分清热药和大蒜的体外抑菌实验 中兽医教研室 沈金阳sjynn@njau.edu.cn 学习要求 通过平板打孔法，(1).学习体外抑菌实验的基本操作，(2).了解部分清热药和大蒜的抑菌作用。 背景介绍-1 药物的体外抑菌试验是为了检查药物的抑菌能力。该项试验方法已广泛应用于新药研究和指导临床用药。如抗菌药物的筛选，提取过程的生物追踪、抗菌谱的测定、耐药谱的测定、药敏试验、药物血浓度测定等各个方面。 背景介绍-1 系列稀释法 琼脂扩散法 液体培养基系列稀释法 固体培养基系列稀释法 测定药物的最小抑菌浓度（MIC） 背景介绍-1 系列稀释法 琼脂扩散法 液体培养基系列稀释法 固体培养基系列稀释法 测定药物的最小抑菌浓度（MIC） 滤纸片法 打孔法 挖沟法 管碟法 ：抗菌药物的筛选 背景介绍-1 系列稀释法 琼脂扩散法 液体培养基系列稀释法 固体培养基系列稀释法 测定药物的最小抑菌浓度（MIC） 滤纸片法 打孔法 挖沟法 管碟法 ：监测抗菌药物血药浓度 背景介绍-1 系列稀释法 琼脂扩散法 液体培养基系列稀释法 固体培养基系列稀释法 测定药物的最小抑菌浓度（MIC） 滤纸片法 打孔法 挖沟法 管碟法 背景介绍-1 系列稀释法 琼脂扩散法 液体培养基系列稀释法 固体培养基系列稀释法 测定药物的最小抑菌浓度（MIC） 滤纸片法 打孔法 挖沟法 管碟法 ：测试药物对不同种细菌的抑制 背景介绍-1 系列稀释法 琼脂扩散法 液体培养基系列稀释法 固体培养基系列稀释法 测定药物的最小抑菌浓度（MIC） 滤纸片法 打孔法 挖沟法 管碟法 背景介绍-2 清热药指药性寒凉，以清解里热为主要作用的中药。 清热泻火药 清热燥湿药 清热解暑药 清热凉血药 清热解毒药 清虚热药 知母 黄连 黄芩 黄柏 金银花 荷叶 地黄 青蒿 连翘 背景介绍-3 大蒜 为百合科葱属植物蒜Allium sativum L.的鳞茎。人工栽培。具有解毒消肿，杀虫，止痢之功效。常用于痈肿疮疡，疥癣，肺痨，顿咳，泄泻，痢疾。 蒜氨酸 大蒜酶 大蒜素 及其 他 含 硫 化 合 物 挥发性 实验操作 一、部分清热药的抗菌实验 观并测量抑菌圈直径（明天12:15） 琼脂平板 （塑料） 100μL大肠杆菌悬液，“L”棒涂匀 均匀打 5 个孔， 火焰稍加热封底 标记 中药药液 加满孔 灭菌水 加满孔 37℃培养24h （206房间） 黄连、黄芩、黄柏、连翘、灭菌水 二、挥发性成分的抗菌实验 2.皿盖中央放倒置无菌青霉素盖，石蜡固定，无菌镊移 取少量大蒜泥填满青霉素瓶盖凹陷； 1.取一琼脂平板（玻璃），100μL大肠杆菌悬液，“L”棒涂匀； 3.将琼脂培养皿倒置于盛有大蒜泥的培养皿盖上，切勿接触青霉素盖。放入37℃培养24h，观察并测量抑菌圈的直径；（明天12:15） 4.同上操作，取无菌生理盐水加入青霉素盖凹陷内作为对照组。 大蒜、灭菌水 注意事项 1、全班4组，每组出4位同学各做一块板； 2、所有试验所用菌液、接触菌液的枪头、培养基均应收集到75%乙醇烧杯中，最后集中灭菌处理； 3、操作靠近酒精灯火焰范围；接菌时平板盖不要完全敞开，避免空气中杂菌污染； 4、涂布时，要等涂布棒稍冷再涂布，涂布要均匀；吸取细菌时，要将菌液摇匀。 5、打孔加药时不要使供药液溢出孔。加药后，用记号笔在平板底部做标记，不能标在平板盖上； 6、打孔法和倒牛津杯法培养时培养皿放置方向不一致。 1.李时珍称连翘为“疮家圣药”.中医经验称,连翘主治一切炎性疾患,如脓包疮、淋巴腺炎、淋巴管炎、丹毒、疮疖及多种急性传染病,特别是球菌性传染病.刘国声氏报告,连翘对伤寒杆菌,霍乱弧菌,大肠杆菌,葡萄球菌,白喉杆菌等有抗生作用。 其酚类成分是抗菌的主要成分 * 在大蒜粉碎或受到病原物等侵入时, 大蒜 中 含有的蒜氨酸或 S- 烯丙基半胱氨酸亚砜, 遇大蒜 酶分解产生大蒜素, 大蒜素进一步分解产生各种 硫 醚 化 合 物 * 1.移液枪使用注意事项：不要超量程使用，慢吸快打； 2.注射器针头挑出； * * * 1.李时珍称连翘为“疮家圣药”.中医经验称,连翘主治一切炎性疾患,如脓包疮、淋巴腺炎、淋巴管炎、丹毒、疮疖及多种急性传染病,特别是球菌性传染病.刘国声氏报告,连翘对伤寒杆菌,霍乱弧菌,大肠杆菌,葡萄球菌,白喉杆菌等有抗生作用。 其酚类成分是抗菌的主要成分 * 在大蒜粉碎或受到病原物等侵入时, 大蒜 中 含有的蒜氨酸或 S- 烯丙基半胱氨酸亚砜, 遇大蒜 酶分解产生大蒜素, 大蒜素进一步分解产生各种 硫 醚 化 合 物 * 1.移液枪使用注意事项：不要超量程使用，慢吸快打； 2.注射器针头挑出； * * *