美洛西林酸中微量杂质结构的鉴定.docVIP

精品论文 参考文献 美洛西林酸中微量杂质结构的鉴定 武义县第一人民医院 西药房 浙江武义 321200 【中图分类号】 Ｒ927 【文献标识码】 A　　 【文章编号】 1550-1868（2016）6 摘要 美洛西林是一种广谱抗生素，主要用于大肠埃希菌、肠杆菌属、变形杆菌等革兰氏阴性菌中敏感菌株所致的呼吸系统、泌尿系统、消化系统、生殖系统等感染。美洛西林酸作为合成美洛西林的原料药，其中含有的微量杂质直接影响美洛西林产品的质量。本研究为美洛西林酸生产过程中的质量控制提供了有益的数据，同时也为其他药品中微量杂质的分离和结构确认提供了有益的参考。 关键词：美洛西林酸杂质制备液相色谱法高效液相色谱法 本试验通过研究影响美洛西林酸中杂质产生的因素，并对微量杂质进行分离，对其进行了核磁共振氢谱、红外光谱、质谱等结构确证。本研究为美洛西林酸生产过程中的质量控制提供了有益的数据，同时也为其他药品中微量杂质的分离和结构确认提供了一定的参考。 1.1高效液相色谱条件 仪器Waters2695色谱柱AgilentSB-C18(4.6times;250mm,5um)波长210nm流动相?磷酸盐?缓冲液?乙腈=80:20，（磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾4.90g和磷氢二钾0.45g，加水溶解并稀释至1000mL）流速1ml/min 1.2影响美洛西林酸中杂质含量的条件 1.2.1光照处理 分别称取美洛西林酸0.9909g和1.006g置于100mL的烧杯中，在其中一个烧杯中加入2mL水，搅拌均匀，一起置于红外灯下光照5h、10h、15h和24h。分别取少量不同光照时间的加水和不加水的样品，配制成1mg/mL的溶液，用磷酸盐缓冲液:乙腈=24:21（其中磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾4.90g和磷酸氢二钾0.45g，加水溶解并稀释至1000mL）的溶液溶解，用上述液相条件的高效液相色谱进行分析。 1.2.2强酸处理 分别配制pH=1和pH=2的盐酸溶液50mL，加入1.0g美洛西林酸，置于磁力搅拌器上均匀搅拌2h，过滤烘干，取少量干燥的处理品，配制成1mg/mL的溶液，用磷酸盐缓冲液:乙腈=24:21（其中磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾4.90g和磷酸氢二钾0.45g，加水溶解并稀释至1000mL）的溶液溶解，用上述液相条件的高效液相色谱进行分析。 1.2.3强碱处理 分别配制pH=12和pH=13的氢氧化钠溶液50mL，加入1.0g美洛西林酸，置于磁力搅拌器上均匀搅拌2h，过滤除去不溶物，得到澄清溶液，测得pH值分别为7和11。于澄清溶液中滴加1M盐酸溶液直至沉淀完全产生，过滤烘干，取少量干燥的处理品，配制成1mg/mL的溶液，用磷酸盐缓冲液:乙腈=24:21（其中磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾4.90g和磷酸氢二钾0.45g，加水溶解并稀释至1000mL）的溶液溶解件的高效液相色谱进行分析。 2.1主要杂质的分离和富集 取pH=13的强碱处理品0.1g，溶于20mL的乙腈溶液中（水:乙腈=50:50），超声使其溶解，用微孔滤膜过滤，利用制备液相色谱进行分离，每次进样量不超过1mL，重复实验；利用旋转蒸发仪对收集到的杂质进行浓缩，加入少量乙腈萃取出杂质，过滤除去磷酸盐，再次浓缩，得到黄色油状物。在利用制备液相色谱分离杂质的过程中，将其他一些杂质收集起来，浓缩，为以后杂质分离提供材料。 2.2杂质的纯化 一次制备所得的杂质纯度在93%左右，须对其进行二次制备纯化杂质，使之纯度提高。在黄色有状物的杂质中加入3mL乙腈，使其充分溶解，利用制备液相色谱进行二次分离，进样量为1mL，利用旋转蒸发仪对分离得到的主要物质进行浓缩，加入少量乙腈萃取，过滤除去磷酸盐，旋干，得到黄色油状物，利用高效液相色谱对其纯度进行检测。 3.1光照处理结果 不同光照时间对美洛西林酸中的杂质有一定的影响，随着光照时间的延长,杂质影响的程度越大，但是增加了原产品中未含有的杂质，对已有的单个杂质的含量并没有很大的影响 3.2强酸处理结果 将美洛西林酸溶于乙腈水溶液（乙腈：水=50：50）中，于pH为2.3以下进行搅拌，处理，结果发现低于2.3的不同pH值盐酸溶液对美洛西林酸中杂质含量的影响较小 3.3强碱处理结果 美洛西林酸与氢氧化钠溶液会产生酸碱中和反应，形成美洛西林钠溶液，利用返滴定原理，于美洛西林钠溶液中滴加盐酸，使之重新转化为美洛西林酸。不同pH值的氢氧化钠溶液与美洛西林酸的中和程度不同，产生的结果也不同。pH大于8小于12的氢氧化钠溶液对美洛西林酸中杂质的影响较小，而pH为13的氢氧化钠溶