电场法制备海藻酸钠微胶珠的多通道放大研究.pdfVIP

电场法制备海藻酸钠微胶珠的多通道放大 * 谢威扬 张家明 王乐群 马小军 （中国科学院大连化学物理研究所，辽宁大连 116023） 摘要：利用精控电场制备微胶珠是生物微囊化技术的重要工艺技术之一。因电场对生物产物 的活性破坏较小，故其工艺制备方法具有极重要的规模放大意义。但由于产品尺寸是微米的 原因，采用电场法制备粒径和性能都分布较窄的微胶珠，其制备放大和放大结果的重复性控 制都较困难。本文研究工作以海藻酸钠溶液为基本原料，通过多通道出口等电场场强的微胶 粒制备系统，实现海藻酸钠微胶珠制备的放大和稳定量产。测定了微胶珠的粒径和粒径分布， 球磨法测定了微胶珠的耐磨强度，获得粒径和性能较窄分布的微胶珠。为微胶珠及其衍生的 微胶囊的规模化生产和制品质量控制具有重要指导意义和潜在的应用价值。实验结果显示： 电场法制备微胶珠的多通道与单通道形式一样，其制备电场的电压，脉冲频率，脉宽，通道 直径，液体流量等因素的控制对微胶珠粒径和性能的形成起非常重要的作用，但在多通道制 备海藻酸钠微胶珠的控制条件中有一些重要的因素常常导致放大制备结果不稳定，其一是多 通道端口尺寸的精确统一。其二是海藻酸钠溶液从多通道端口挤出，撕裂成微胶珠的瞬间， 其空间电场强度需是等电场强，而电场强度的三维精确控制在空间上强烈依赖于电场输出电 极的三维几何形状设计，在时间上强烈依赖于电场输出波形设计。而形成的微胶珠粒径和性 能与单通道法或多通道法制备无关。 关键字：电场 制备 海藻酸钠 微胶珠 中试放大 引言 利用精控电场制备微胶珠是生物微囊化技术的重要工艺技术之一。因电场对生物产物的 活性破坏较小，故其工艺制备方法具有极重要的规模放大意义。已发表的相关脉冲电场装置 研究几乎都是围绕单支注射针配备脉冲电场和注射泵进行。研究重点多集中在单通道输出下 脉冲电场的输出电压，脉冲频率、注射泵流速、针头内径及海藻酸钠浓度等对胶粒粒径和胶 粒粒径分布影响规律上。却鲜有采用脉冲电场法单批次制备量超过几百毫升的高效率大批量 制备的基础研究报道。本文研究工作从分析装置着手，以海藻酸钠溶液和CHO 细胞为介质模 型，通过探讨装置优化设计和工艺条件的精控，来实现多通道电场制备微胶粒放大和稳定量 产。 1 实验装置与材料 1.1 典型装置 典型脉冲电场法制备微胶粒装置如下图1。 图1 为脉冲电场法制备微胶粒装置原理图 装置使用单只注射器（4），在注射器泵（5）匀速推动下，利用脉冲电场力实现微胶粒 的制备。电场通过注射器的针头（2）和烧杯中的溶液（1）构成电场两极。针头既是海藻酸 钠溶液向下留出的锐孔通道，又是脉冲电场的高电平电极端。烧杯中的溶液即为凝胶浴又是 地极，两者之间形成的脉冲电场力“切割”作用于海藻酸钠溶液（3）形成微米级液滴。 台湾产RAZEL 注射器泵，自制YD-04 电场发生仪，美国BECKMAN-COULTER 公司产LS-100 Coulter 激光粒度仪，日本Olympus 公司产生物倒置显微镜CK40 型。 1.2 实验材料 海藻酸钠：青岛胶南明月海藻工业有限公司产品；氯化钙，市售分析纯试剂。CHO 细胞 为本实验室自行传代培养。 1.3 数据处理 由于通常胶粒粒径的粒径是采用平均粒径和胶粒粒径分布来评价，故实验获得的微胶珠 采用激光粒度仪测定微胶珠粒径和粒径分布，其粒径分布用Cv 值表达。（Cv = ( σ/ d)×100 %, 其中d =∑di /n 为微胶珠的平均粒径, di 为第 i 个微胶珠粒径，n 为微胶珠总数, 标 准偏差σ= [∑( di - d) 2 ]1/2 /n）。Cv 值越小，微胶珠粒径分布越窄。 2 实验结果与讨论 2.1 平行放大 为排除实验中材料的影响，实验采用同一批海藻酸钠溶液，标准的典型实验装置五套， 同一操作条件同时进行操作。收集结果测定发现，五套装置产品平均粒径差异较大。单独测 定每个装置产生的微胶珠Cv 值可在15～25％。如果将五套装置产生的微胶珠共混后，测定 Cv 值可达到75﹪甚至更大。为了排除装置因素影响，采用同一套注射器泵装置，五套同规 格注射器和同规格针头进行实验，结果混合产品测定Cv 值仍75﹪。 2.2 影响因素分类 影响因素可归为两类，第一类因素为溶液特性因素，与装置无关，如：海藻酸钠溶液粘 度，密度，电导率，表面张力等。通过空白实验可以扣除。第二类因素是与装置有关，