交感神经对小鼠妊娠早期和子宫局部肥大细胞的影响研究.pdfVIP

获奖论文 47 交感神经对小鼠妊娠早期和子宫局部肥大细胞的影响+ 董玉兰” 陈耀星一 王子旭马爱团 (中国农业大学动物医学院北京100094) 摘要：本文研究变感神经时妊娠的调控机制，为奎面褐示神经一内分泌一免疲网络调控妊娠发生和发展的作用机理 提供基础资料。为此，路昆明小鼠腹腔注射交感神经阻断剂6一OHDA(100n叫k体重)，利用光镜组织学技术、组织化学技 术，荧光分析方击，检测交感神经对妊娠早期胚胎发育、子宫内膜的组织学结构、子宫局部肥太细胞数量厦组织胺释放的影 响。结果表明：昆明小鼠腹腔连续注射交感神经损毁荆5d，能有效损毁外周史感神经。交感神经损毁后，胚胎着康率减少 约64．4％，妊娠早期胚胎发育域缓。交感神经损毁后．妊娠早期子宫内膜腺体发育不兹，血管匮乏。交感神经抑制着床期 肥大细胞的数量和组织胺的释放。史感神经损毁后妊娠早期子宫内肥大细胞数量在着床期明显升高(P(0．01)．子宫组织 中组织胺含量明显升高(E3除外)。因此，变感神经不仅通过促进子宫组织结构的发育以适应妊娠发生、发展需要，而且调 控子宫局部的肥太细胞的数量和组织胺分泌，从而维持妊娠的发生，促进妊娠早期胚胎的发育。 关键词：变感神经；妊娠早期；胚胎发育；肥大细胞。 在哺乳动物精卵结合形成合子至发育成熟、分娩过程中。约有40％一60％的胚胎会发生死亡，其中早 期胚胎死亡占67％。早期胚胎死亡对畜牧养殖造成了极大的经济损失，在美国，仅此造成的经济损失约 高达14亿美元。究其发生原因，除了染色体异常、胎儿畸形和母体内分泌紊乱等因素外，仍有70％的流 儿不被母体排斥的机理，一直是现今生殖生物学领域倍受关注的焦点。我们前期研究亦发现支配子宫的 交感}I}f经分布在妊娠过程中呈退行性变化【lj。这提示神经与生殖有内在的联系，但我们尚不清楚交感神 经调控早期胚胎发育的机制。因此，本实验拟采用化学方法损毁外周交：神经，通过研究子宫组织学结 构和子宫局部肥大细胞数量和组织胺释放的变化来阐明交感神经调控胚胎着床的作用机理。 1材料和方法 1．1动物处理 成年雌性昆明小鼠75只，80 L：i龄，体重30—409。实验动物经正常饲养7d后，分为2组，实验组腹腔 6一OHDA含O．01％抗坏血酸的灭菌生理盐水；对照组注射含0．01％抗坏血酸的灭菌生理 注射100ms／kg 盐水。每只小鼠腹腔注射0．2mL，1次，d，连续注射5d。停药后第2d通过阴道涂片法鉴定发情者，雌雄合 死。 1．2实验方法 实体解剖镜下将El—E9小鼠输卵管和子宫取出，收集各发育阶段的卵子或胚胎，观察胚胎的个数， 测量胚胎的大小。子宫角组织一部分作冰冻切片(乙醛酸诱发荧光法检测神经损毁程度)，一部分经4％ ·【蕈金项目]国家自然科学基金资助30270960。 *}【作者简介]董：五兰(i977．8一)，女，山东粱山人，博士，主要从事神经免疫学研究。E—m出l：ylhccbng@can．odu．m。 Ⅲ通讯作者．E—mail：yxdum@cau．幽aITEL：010 2006学术年会 多聚甲醛磷酸盐缓冲液固定2d，制作石蜡切片。常规HE染色，镜下观察组织结构；改良甲苯胺蓝(MTB) 染色法和阿尔新蓝一番红(AB—S)染色显示子宫中肥大细胞数量和类型。部分新鲜的子宫组织，进行组 织匀浆．荧光光度分析法检测组织胺浓度。 1．3生物统计分析 Ttest进行统计学分析，实验结果用均数4-标准差(mean 以上数据用SPSS软件的Independent—sample ±SD)表示，P(0．05为差异有显著性。 2结果 2．1 乙醛酸诱发荧光法检测神经损毁程度 荧光显微镜下观察，如图1所示，第1组子宫组gJ,q．交感神经荧光点显著减弱，纤维终末几乎全部消 失(图A)，对照组(第Ⅱ组)显示细长的神经纤维末梢(图B)。 图1 A．神经损毁组子宫交感神绎分布，SPG法显示交感神经终末完全损毁B．对照组，箭头所示为交感神经元 末梢，呈细线状C．对照组受精卵D．6一OHDA处理后的小鼠子宫(E9)，锥形箭头所指为卵巢，长形箭头所指为