氟致牛外周血淋巴细胞凋亡及DNA损伤效应研究.pdfVIP

第6届家畜内科学学术研讨会论文集 高，但需要昂贵设备及专业技术，ELISA法特异、灵敏、快速、简便，可迅速检测大量样品，因而受到 广泛重视，现已成为国际上检测生物毒素的常规方法之一。 3．2生物素—链酶亲合素(BSA)系统是—个生物反应放大系统，其灵敏度高n11。分析其原因有： 首先，生物素与链霉亲合素的结合力极高，其结合是不可逆的的。其次，生物素标记抗体后，一般不 会影响其活性。第三，生物素对抗体的标记率达到99％以上，不存在未标记抗体竞争对灵敏度的影响。 最后，一个链霉亲合素可以结合多个生物素化的酶分子，故当有—个生物素化的抗体与链霉亲合素相 kDa一 连时，就可以结合多个酶分子，从而产生放大效应。由于相思子毒素是一种分子量较大(约为60 65 kDa)的糖蛋白，与相同体积、浓度、分子量较小的其它抗原相比较其分子数量较少。如用普通ELISA 检测，其灵敏度会受到影响，因此，我们采用前期实验建立并优化的BSA-ELISA法组装试剂盒，其优点 是非特异吸附很低，灵敏度高。 3．3该试剂盒的特异性、灵敏度、重复性、再现性、稳定性均在临床检测可接受范围内，标准曲线 关系良好，可用于相思子毒素的定量、定性检测。但本试剂盒的保存条件目前仅限于-20℃，为了拓宽 试剂盒的保存条件，还需要对各种试剂的各组份进行改良，加入不同浓度和不同种类的蛋白保护剂等 进行储存实验，以便减少在使用条件上的限制。 参考文献：(略) 氟致牛外周血淋巴细胞凋亡及DNA损伤效应 王敏，邢厚娟，朱绯，徐世文。 【东北农业大学动物医学院．哈尔滨150030) 摘要l目的探讨氟化钠(NaF)致体外培养的黄牛外周血淋巴细胞损伤和诱导细胞凋亡作用。方法应用淋巴细 培养体系中，24h后。采用四甲基偶氮唑盐㈣比色法检测细胞活性，吖啶橙／溴化乙锭(AO／EB)染色法观察细胞核 变化，琼脂糖凝胶电泳法检测DNA断裂情况，碱性SCGE检测DNA损伤情况。结果随NaF浓度增加，细胞存活率显 著下降(PO．01)；观察到特征性凋亡细胞及有明显的DNA损伤，并呈现明显的剂量效应关系。结论一定浓度的NaF 有致淋巴细胞损伤和凋亡的作用。 关键词：NaF；牛外周血淋巴细胞；DNA损伤；凋亡 E仟ectofsodium fluorideonDNA and inox damageapoptosis blood -。peripherallymphocyte WANG Min，础GHouJuan，ZHUFei，XUShiWen ofVeteri懈ryMedicine,Northeast ．(Department AgriculturalUniversity,Harbin]50030) To theeffectofsodiumfluorideonDNA and onox Abstract：Objective explore damageapoptosis blood culturedinvitro．Methods mediumto pefipherfllymphocyte Usinglymphocytes separate separation anddifferentconcentrationof added lymphocytes 第6届家畜内科学学术研讨会论文集 thecultural of for24h．Cell wasme