海嘧啶对H22小鼠完整细胞膜脂流动性及人胃腺癌细胞内DNA含量影响的研讨.pdfVIP

t宁·土哇 全国峪耳t●技术与瘁并番●学术套议语文毒 2006．8．2-6 主细胞生长变慢，推测可能是G．CSF蛋白的表达影响了细胞生长。通过对光合放氧曲线的测定表明， 转G．CSF基因的鱼腥藻的光补偿点与光饱和点都与野生型鱼腥藻基本相同，暗示了G．CSF的表达对 宿主的光敏感性影响不大；同时，G．CSF的转入使宿主的呼吸作用加强，显示了G．CSF基因的转入 可能给宿主带来更大的代谢负荷；从真正光合活性来看，转基因藻光合放氧能力与野生藻相比还略有 提高，说明GCsF的转入没有破坏宿主的光合反应中心。 光台和生长测定的结果是一致的，即在培养液中蓝藻细胞较少时，外源基因的表达对鱼腥藻的 生长影响不大，有时有利于转基因鱼腥藻的生长，在生长的稳定期。转基因藻生长速度变慢，推测是 外源基因的表达抑制了鱼腥藻的生长。同时，经测定在不同生长时期G．CSF蛋白表达量不同，在培 养第21天时，G．CSF蛋白表达量达到最大值．因此，可在20天左右收藻，既保证转基因藻正常生长． 又保证了外源蛋白的表达；并且，在生长周期的前20天，转基因并没有影响转基因藻的生长。因此， 此藻种可用于大规模生产制各口服制剂。 海嘧啶对H22小鼠完整细胞膜脂流动性及人胃腺癌细胞内DNA含量影响的 研究 季字彬1，张秀娟1，孔琪’，高世勇1，杨宝峰2 (J．哈尔滨商韭大学生命科学与环境科学研究中o，中国，哈尔滨，150076；2哈尔滨医科大学，中 国哈尔滨150086) 摘要目的研究海嘧啶对荷瘤小鼠红细胞膜的影响以及对人胃腺癌细胞DNA合成的影响。方法采 用荧光分光光度法及激光扫描共聚焦显微镜进行研究。结暴海嘧啶可使荷瘤小鼠红细胞微粘度下降， 膜脂流动性升高，肿瘤细胞内DNA荧光强度降低，DNA合成减少．结论海嘧啶可改善荷瘤机体的 血液循环，提高红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力，同时，通过影响肿瘤细胞内DNA的合成发挥抗肿 瘤作用． 关键词海嘧啶，抗肿瘤作用机制。膜脂流动性，肿瘤细胞DNA 海嘧啶是由5-Fu与中药黄芪(Astragalus)、海藻(Sargassum)、昆布(Eeklonialcurome)、苦参(Sophom narescens)等提取的有效成分组成的新型复方抗肿瘤制剂，在充分发挥5-Fu抗肿瘤作用的同时Ⅲ，辅 以中药有效成分可达到减毒、增效、增敏、强体的目的，作为一新型抗肿瘤药物，药效学试验已证明 海嘧啶对多种动物移植性肿瘤有明显的抑瘤作用口1，为进一步探讨其作用机制，本实验通过海嘧啶对 红细胞膜脂流动性及肿瘤细胞DNA含量变化考察该药物的作用特点。 1．实验材料 1．1实验动物昆明种小鼠，体重20士29．雌雄兼用。购自哈尔滨医科大学实验动物中一O；H22荷瘤小鼠 购自哈尔滨医科大学附属第三医院动物研究所。 1．2实验药品 X黑龙江省自然科学基金重点项 基金项目：国家自然科学基金项目；因家教育部重点科研项目(们035 目(ZJY0504)：黑龙江省青年基金项目(Qc05c84)． 作者简介：季宇彬(1956．8．)，男，博士，博士后，教授，博士研完生导师，研完方向：抗肿瘤药物研究． 231 过宁·土t 奎国辱耳生幡技术与薛耳15格学术套议论文曩 2006．8．2-6 冷至室温后分装，．20C保存：人胃腺癌细胞购自哈尔滨医科大学公箍卫生学院；RPMIl640培养液 Gibco产品： 1_3实验仪器 激光扫描共聚焦显微镜Ins]曲t 津；Scp85A低温高速离心机日本目立；超静工作台苏州净化设备厂；二氧化碳培养箱日本三洋． 2．实验方法 2．IH22小鼠完整红细胞膜脂流动性的测定无菌条件下取H22腔水癌细胞3m1．以O．9％生理盐水作1： 3稀释。取已随机分组的小鼠，腹腔接种，O．2ml／只。于停药次日处死．取全血，0．1％肝素抗凝荧光 偏振度的测定见文献[3】， n=2p／(O．46-p)141,LFu=o．5-p，p2■ 2．2人胃腺癌细胞DNA的测定细胞常规复苏、传代、用台盼蓝染色记细胞数量，用培养液将其调整