实验八 PPT.pptVIP

药物分析实验 实验八 维生素B1片含量测定的方法验证 设计性实验 实验原理 维生素B1又称盐酸硫胺 （thiamine hydrochloride），化学名称为氯化4-甲基-3[(2-甲基- 4-氨基-5-嘧啶基)-甲基]-5-(2-羟基乙基噻唑鎓盐酸盐 性 质 溶解性：水中易溶，乙醇中微溶，乙醚中不溶 硫色素反应： 紫外吸收特性：Amax=246nm 与生物碱沉淀试剂反应 氯化物特性： 特征性鉴别 含量测定 氯化物检查 原理 特征性鉴别——硫色素反应 维生素B1在碱液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，色素转溶于正丁醇(或异丁醇、异戊醇)中，显现于酸中消失的蓝色荧光。（见刘文英主编《药物分析》第六版，P258） 含量测定 维生素B1有紫外吸收，Amax=246nm， 实验方法 鉴别反应 取本品约5mg，加氢氧化钠试液2.5ml使其溶解，加铁氰化钾试液0.5ml与正丁醇5ml，强力振摇2min，放置使成两液层，上层醇液即显强烈的蓝色荧光，加酸使成酸性荧光即消失，再加碱使成碱性，则荧光复现。 线性关系和范围 分析方法的验证 1 精密度试验 2 重现性试验 3 加样回收试验 4 稳定性试验 5 线性与范围 目的 范围：达到一定精密度、准确度和线性、测定方法适用的高低限浓度或量的区间 线性：测试结果与试样中被测物的浓度或量直接呈正比关系的程度 要求 至少5份系列浓度的对照品溶液，高、低浓度之间要有明显差距，最好能有一定的比例关系。 线性相关系数符合规定，如UV-Vis法，r 0.99；HPLC法，r 0.999 列出回归方程、相关系数和线性图 线性关系考察(示例） 精密度试验 目的 检测仪器、试剂、操作人员、实验条件等的可信程度 要求 用对照品按样品溶液的制备方法制备对照品溶液，同浓度至少平行操作6份，浓度与信号值要在线性范围内 RSD 2.0% ……仪器分析 精密度试验（示例 ） 重现性试验 目的 考察样品溶液制备方法的可靠程度 要求 同批样品按相同方法制备样品溶液，至少6份,浓度与信号值均要在线性范围内 RSD 2.0% ……仪器分析 重复性试验(示例) * * ·1