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内科学课件-心房纤颤患者血栓前状态及心房电重构的实验研究
;前 言;前 言; 本研究提出房颤患者的PTS,并通过检测房颤患血浆中PTS分子标志物的水平,探讨房颤患者PTS的形成机制,寻找评估房颤患者栓塞危险性的新手段,以指导抗凝治疗。
;心房纤颤具有自身延续性,慢性房颤的发生与维持似乎与房颤本身有关。据此,Allessie等提出了房颤引发房颤的观点。
在房颤的持续过程中,房颤本身可导致心房电生理学特性的变化,即心房电重构(AER)。
研究表明,在AER中心房肌细胞内钙超负荷起了重要作用
肌浆网钙泵在调控细胞内Ca2+浓度方面起决定作用; 本研究采用RT-PCR方法,通过在分子生物学水平测定心房肌细胞肌浆网Ca2+-ATPase的mRNA表达,探讨房颤患者AER的机制,以加深对房颤本质的认识,从而使房颤预防和治疗的新的方法成为可能。 ;第一部分;材料与方法;一、研究对象及分组情况; 房颤组与对照组的所有入选对象均除外心绞痛、心肌梗塞,心电图及Holter均未见缺血性改变。无明显高脂血症、无糖尿病、脑梗塞、心功能不全及肿瘤。房颤组有11人服抗凝药,为巴米尔0.1Qd或抵克利得0.25Qd,对照组均未服用抗凝药。
;二、主要设备及制剂 (1);2.试剂
CD61抗体 美国Becton-Dickinson公司
PAC-1抗体 美国Becton-Dickinson公司
鼠IgM 美国Becton-Dickinson公司
FITC荧光染料 美国Becton-Dickinson公司
1%多聚甲醛
血栓调节蛋白ELISA法试剂盒 美国ADI公司
牛血清白蛋白(BSA) 美国Sigma公司
0.5M H2SO4
酶标TAT微孔板 美国
D-二聚体ELISA法测定试剂盒 美国 ;三、实验方法;血浆血栓调节蛋白(TM)水平的测定 ——ELISA法
血浆凝血酶-抗凝血酶III复合物(TAT)的测定——ELISA法
血浆二聚体D(D-dimer)的测定——ELISA法
;TM标准曲线;TAT标准曲线;D-dimer标准曲线;统计学处理;结 果;
入选对象共55人,其中房颤组29人,对照阻26人。房颤组又分为:持续房颤组18人,阵发房颤组11人。;*房颤组vs对照组P0.05
; 房颤组GPIIb/IIIa测得值明显高于对照组,差 别具有高度统计学意义(P0.01)
;房颤组与对照组血浆GPIIb/IIIa比较;持续房颤组的GPIIb/IIIa水平明显高于阵发房颤组,差别有高度显著性(P0.01), ;持续房颤组与阵发房颤组GPIIb/IIIa比较;各组之间GPIIb/IIIa比较;房颤时间与GPIIb/IIIa水平的相关性;房颤患者血浆TM水平的变化 ;房颤组与对照组血浆TM水平比较;房颤患者血浆TM水平的变化 ;持续房颤组与阵发房颤组TM比较;房颤患者血浆TM水平的变化 ;各组之间血浆TM水平比较;;房颤组与对照组血浆TAT水平比较;;;各组之间血浆TAT水平比较;;房颤组与对照组血浆D-dimer比较;;持续房颤组与对照组血浆D-dimer比较;;各组之间血浆D-dimer水平比较;房颤患者心房心肌细胞肌浆网Ca2+-ATPase mRNA的基因表达;材料和方法;
入选者均为我院及安贞医院心外科行换瓣术和冠脉搭桥术的病人,共28例。标本于术中取材于心房或心耳组织。根据有无房颤分为:
1. 房颤组:15人,其中男9人,女6人。年龄35—67(48.13±8.07)岁,均为持续房颤患者,且房颤持续时间均3个月。
2. 对照组:13人,其中男8人,女5人。年龄34—67(51.08±11.89)岁,均为窦性心律者,且既往无心律失常病史。
两组之间年龄、性别无显著差异(P0.05)。
;
高速恒温离心机RC5C 德国Dupont 公司
低温离心机J6-B 美国Beckman 公司
UV-2100紫外分光光度计 日本岛津公司
PE2400 PCR仪 美国
激光图像分析仪 瑞典Pharmacia 公司
电泳仪 北京科普仪器厂
10μl、20μl、200μl及1000μ
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