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活体生物体内成像技术In Vivo Imagine Technology;活体生物体内检验是生物研究的最终验证;目前的活体生物体内成像技术和方向;几种常用活体体内成像技术的比较;活体成像系统 --专门为检测活体动物体内发光而设计的技术;理想的光源：萤火虫或细菌荧光素酶（luciferase）; 荧光素酶的底物—荧光素，为约280道尔顿的小分子。荧光素脂溶性非常好, 很容易透过血脑屏障。注射一次荧光素能保持小鼠体内荧光素酶标记的细胞发光30-45分钟。每次荧光素酶催化反应只产生一个光子，这是肉眼无法观察到的，先进的成像系统，应用一个高度灵敏的制冷CCD相机及特别设计的成像暗箱和成像软件，可观测并记录到这些光子。;;活体成像系统 ;Living Image ?成像及数据分析软件;IVIS?50 Imaging System; 在波长大于600nm时，由老鼠体内发出的光是可以穿透皮肤被检测到。 ;标准图像的组成; 当前肿瘤研究的主要方法还主要局限于肉眼观察、处死老鼠后的肿瘤体积测量、称重及组织学切片观察等。;传统实验方法与活体成像方法比较;结果显示：肿瘤的大体积与生物发光强度呈线性相关;平均肿瘤体积;精诺真具有高度灵敏性;活体成像技术的主要应用;Oncology Applications 癌症研究的应用;体内药物分析的生物发光检测;静脉注射治疗起始点;对照组于第五周结束观察;组织病理学观察;Virology Applications细菌及病毒学研究应用;不同肺炎链球菌菌株感染模式研究;.;siRNA 阻断RNA 研究的应用;当共转染 pGL3-luc 或HCV-luc 表达载体特异的 siRNA时， 可抑制报告基因Luciferase的表达;Stem Cell Research干细胞研究的应用;研究干细胞造血作用;活体内蛋白质-蛋白质之间的相互作用;R. Paulmurugan, et al, University of California, PNAS, 2002 ;活体动物体内观察细胞凋亡;TRAIL激活Caspase 3的体内成像;Transgenic Animal Model (LPTATM Animal) 转基因动物模型的应用;基因激活 表达 生物发光; 血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）是VEGF的同源受体，VEGF在血管生成过程中分泌。Vegfr2-luc转基因小鼠应用从小鼠VEGFR2基因启动子及内皮细胞特异的增强子共4.5kb，以驱动荧光素酶表达。 ;通过观察发育过程中,VEGFR2-Luc转基因小鼠的VEGFR2表达逐渐降低,研究生物体的发育过程。; 已知，VEGFR2启动子活性在肿瘤坏死区域的血管内皮细胞中可被上调。Vegfr2-luc报告基因的活性可在皮肤创伤治愈过程中被诱导及在肿瘤特异的新血管形成中有潜在功能。;小鼠体内一发光点的三维整合图象;生物发光检测与荧光检测的比较;谢谢！