第19章 细胞信号转导(三).ppt

Science (2003): A seven transmembrane RGS protein modulates cell proliferation Methods Enzymol (2004): RGS1 mediates sugar signaling 在模式植物拟南芥中，发现一种非常独特的RGS蛋白。这种天然杂合体先前从没有在任何生物体上发现过，因而这一发现无论在异三聚体G蛋白所介导的信号转导分子机制研究上，还是在进化上都有着极其重大的意义。研究进一步确证RGS蛋白可以和异三聚体G蛋白的亚基存在直接的相互作用，并为其功能提供了直接的分子生物学和遗传学的证据。 RGS蛋白很可能充当葡萄糖的受体。 这一突破性的发现被认为是异三聚体G蛋白研究史上的一个里程碑。 G蛋白介导的信号转导在植物生长发育中的作用 二、蓝光对气孔运动的调节 蓝光促进气孔开放？ 气孔是是控制植物细胞与大气进行水气交换的重要机构，也研究植物细胞信号转导机理的良好的系统之一。 保卫细胞响应蓝光引起气孔张开。 气孔是由一对保卫细胞构成，其张开和关闭运动是由保卫细胞内膨压变化驱动的膨胀与收缩所控制。当保卫细胞从周围环境中被动吸收水分，引起保卫细胞膨胀，膨胀的保卫细胞通过纤维微丝的特异定向作用和保卫细胞细胞壁的不均匀加厚而导致气孔张开。 保卫细胞的被动吸水主要是由K+离子通过保卫细胞膜上的电压门K+离子通道调节和质膜内侧的负电势驱动进入保卫细胞内引起水势降低引起的。 蓝光引起的气孔张开主要是蓝光激活保卫细胞质膜上的H+离子泵（H+-ATPase），后者使膜内侧形成负电势。 1、蓝光激活质膜H+-ATPase的机理 蓝光照射后H+离子从保卫细胞向外“泵”出 蓝光依赖的H+离子向外“泵”出是受保卫细胞质膜上的H+-ATPase所调节 蓝光对H+-ATPase酶的活化与其磷酸化有关 蓝光对H+-ATPase酶的活化作用是通过14-3-3蛋白与H+-ATPase磷酸化羧基末端结合实现的，H+-ATPase酶磷酸化本身不足于导致酶的活化 。 2、蓝光受体 蓝光对H+-ATPase酶的活化作用是通过与存在于保卫细胞内的相应光受体特异结合实现的。 保卫细胞内存在植物向光性有关的蓝光受体，称为Phot1 (Phototropin1)和Phot2 (Phototropin2)。 该蓝光受体调节应答蓝光引起气孔张开的实验证据主要是： （1）LOV结构域的吸收光谱与气孔张开的作用光谱一致； （2）对拟南芥Phot1和Phot2的单突变体，phot1和phot2及双突变体phot1 phot2植株的气孔分析表明，在蓝光处理下，与野生型一样，两单突变体气孔照常开放，而双突变体的气孔则不开放，说明蓝光受体Phot1和Phot2在蓝光调节气孔开放中的作用具有冗余（redundance)； （3）当用真菌毒素fusicoccin直接活化H+-ATPase酶后，该双突变体的气孔正常开放。说明编码两受体基因表达同时受阻后，由于保卫细胞不能感知蓝光而导致蓝光不能促进气孔的开放； （4）用PHOTO1 cDNA转化拟南芥phot1 phot2双突变体，转基因植株叶片气孔恢复了对蓝光的应答； （5）蛋白质定位实验表明，蓝光受体Phot1均匀地定位于保卫细胞质膜上； （6）生物化学分析证明，蚕豆保卫细胞原生质体的蓝光受体应答蓝光后可发生磷酸化，并且达到最大磷酸化水平所需时间比质膜H+-ATPase酶应答蓝光发生磷酸化所需时间要短。当应用蛋白激酶抑制剂处理抑制Phototropins磷酸化时，同时也同样程度地抑制了H+-ATPase酶的磷酸化。 3、从蓝光受体到质膜H+-ATPase酶的信号转导 从蓝光受体Phot1和Phot2到质膜H+-ATPase酶的信号转导及Phototropins自动磷酸化的生理作用目前还不太清楚。 有实验结果表明，应答蓝光后，14-3-3蛋白与蚕豆Phototropins（Vfphot）结合，这种结合依赖于Vfphot自动磷酸化。14-3-3蛋白与Vfphot的结合非常迅速，在蓝光照射1分钟后即发生，去磷酸化则发生在蓝光停止照射后15分钟内。由于Vfphot-14-3-3蛋白复合体的形成在保卫细胞质膜H+-ATPase酶发生磷酸化以前，因此，这一复合体可能是蓝光信号向质膜H+-ATPase酶传递过程中的一个信号传递状态。 另外，在蓝光信号传递过程中是否涉及第二信使Ca2+的参与还不清楚。 思考题： 1、名词解释 配体 信号转导 受体 第二信使 信号级联放大 2、简述细胞信号转导的基本过程。 3、细胞受体有几类？受体有哪些主要特征？ 4、如何理解信号转导途径比代谢途径等要复杂