耐温牙鲆分子标记辅助选育研究.pdfVIP

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第46卷第5期 厦门大学学报(自然科学版) V01.46No,5 2007 ofXiamen Science) Sen 2007年9月 Journal University(Natural 耐温牙鲆分子标记辅助选育研究 池信才¨,王军1,宋思扬2,苏永全“’ (1.厦门大学海洋与环境学院,2.厦门大学生命科学学院,福建厦门361005) 摘要:应用分子标记进行耐温牙鲆的辅助选育.首先应用已知的与耐温性为极显著负相关的牙鲆徽卫星引物P042对 50尾牙鲆亲鱼DNA进行PCR分析.根据PeR分析结果将其分成耐温组和非耐温组.经过人工催产,耐温组的产卵量明 显大于非耐温组和对照组.耐温组繁育的子代仔鱼变态率明显比非耐温组和对照组于代高.在人工增温的条件下,耐温 组仔鱼成括事比非耐温组和对照组的仔鱼显著提高.本研究结果证明t牙鲆徽卫星引物P042可用于耐温牙鲆的分子标 记辅助选育,同时也进一步确认其与牙鲆耐温性状具有关联性. 关键词:牙鲆;分子标记}分子辅助选育-微卫星位点-耐高温 中国分类号:S917 文献标识码:A 文章编号:0438-0479(2007)05—0693—04 et olivaceusTemrninek选. 牙鲆(Paralichthys (2)亲鱼PCR分析样品的采集 Schlegel)是我国北方重要的经济鱼类,1983年菌种批 量繁育成功以来,为我国北方海水养殖引入新的养殖 用MS-222将亲鱼轻微麻醉,在尾柄上挂标志牌, 品种o】.牙鲆主要分布在中国的东海、黄海,渤海到朝 剪取少量背鳍,用70%乙酵保存并注明标签·注意标 鲜半岛和日本沿海,其自然产卵期由南至北逐渐延后, 签与标志牌一致. 在日本九州岛海域为每年的l~2月份c2],而在我国 (3)主要试剂和设备 黄、渤海区为546月份口-5】.中国牙鲆养殖业主要集 1)主要药品及器材 中在黄、渤海沿岸,每年5~6月份开始育苗,由于适温 Ex Biotech— Taq酶购自大连宝生公司(Takara 期较短,当年难于养成大规格鱼种.南方养殖牙鲆虽然 可以解决适温期较短,当年难于养成大规格鱼种的同 MarkerDL2000(Takara 题,但是南方夏季水温过高,普通牙鲆无法顺利度夏, erGeneruler 导致大量死亡,养殖户损失严重.因此我们在前期工作 公司). 取得与耐温牙鲆相关分子标记的基础上,从南方养殖 2)微卫星引物 的牙鲆中筛选出耐高温亲鱼,以期通过培育耐温品系 本实验所用的微卫星引物来自于本项目组前期研 解决南方养殖牙鲆无法度夏的难题. 究得到的与耐温性状相关的牙鲆微卫星引物P042【‘], 序列为F R5,- 1材料与方法 1.1材料 成. (1)实验用亲鱼一 1.2方法 亲鱼购买自漳浦龙泽海产养殖有限公司.挑选无 (1)牙鲆总DNA的提取 cm, 牙鲆总DNA的提取参考文献[7]. 伤

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