胶质瘤患者脑脊液和血清中GPR56的检测及其临床意义.docVIP

精品论文 参考文献 胶质瘤患者脑脊液和血清中GPR56的检测及其临床意义 杨刚 （兰州大学第一医院神经外科 甘肃兰州 730000 ） 【摘要】 目的 检测胶质瘤患者脑脊液和血清中可溶性GPR56的水平并探讨其临床意义。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法检测41例胶质瘤患者与31例脑外伤患者的脑脊液和血清GPR56水平，分析各组间GPR56表达差异。结果 胶质瘤患者脑脊液GPR56水平(11.73plusmn;5.64)mu;gPL明显高于脑外伤患者(4.81plusmn;2.19)mu;gPL，Plt;0.01。垂体瘤患者GPR56水平(10.45plusmn;3.67)mu;gP L高于脑膜瘤 (9.78 plusmn;3.39)mu;gPL、神经鞘瘤(8.89plusmn;2.31)mu;gP L和听神经瘤(9.62plusmn;2.27)mu;gPL,Plt;0.05。胶质瘤患者血清GPR56水平(49.14plusmn;16.16)mu;gPL明显高于脑外伤患者(32.67plusmn;12.28)mu;gPL,Plt;0.01。垂体瘤患者GPR56水平 (54.51plusmn;20.67)mu;gP L 高于脑膜瘤 (36.78plusmn;13.39)mu;gPL、神经鞘瘤(42.79plusmn;12.31)mu;gPL和听神经瘤(44.62plusmn;12.27)mu;gPLPlt;0.05。结论 胶质瘤患者脑脊液和血清中高水平的GPR56提示GPR56可能在胶质瘤的发生发展中有重要作用，可为胶质瘤的诊断和治疗提供一种新的靶位点。 【关键词】胶质瘤 GPR56 E LISA 夹心法 脑肿瘤是神经系统中常见的疾病之一，对人类神经系统的功能有很大的危害，仅年来，颅内肿瘤发病呈上升趋势，据统计，原发性颅内肿瘤的发病率为7.8-12.5/10万人，约占全身肿瘤的5%，占儿童肿瘤的70%，而其他恶性肿瘤最终会有20%-40%转入颅内。神经胶质瘤(glioma)是颅内常见的原发性肿瘤，占颅内肿瘤的70%[1]。 G蛋白偶联受体（GPCRs）是真核生物中最大的一类跨膜受体家族，目前已经报道的CPCRs多大800多种。其中G蛋白偶联受体超家族粘附亚家族所含的成员超过33个[2]。CPR56，即TM7XN1（7次跨膜蛋白非表皮生长因子样氮末端结构域1；Genbank序列号 no.NM-005682），是一个孤儿G蛋白偶联受体（GPCR），属于拥有33个成员的分泌素样受体的GPCR亚家族，最近发现GPR56涉及大脑皮层模式的形成，同时GPR56突变与双侧额顶叶多微脑回畸形相关。研究表明，成年患者中没有观察到中枢系统外的表型，提示组织发育成熟后，GPR56是非必须的[3]。最近研究表明，与正常脑组织相比，GPR56在人类胶质瘤中过表达，提示其在细胞粘附和胶质瘤形成中扮演者重要角色。[4] 酶联免疫吸附试验(Enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA)是一种常用于检测蛋白质的传统方法。本文旨在于收集胶质瘤患者（垂体瘤、脑膜瘤、神经鞘瘤、听神经瘤等）的脑脊液和血清，以脑外伤患者的脑脊液和血清为对照组，运用ELISA双抗体夹心的方法（GPR56的标准抗体和HRP标记羊抗兔 IgG）检测各组脑脊液和血清中GPR56蛋白的表达情况，并分析其差异及临床意义。 1 资料与方法 1.1 脑外伤对照组 共31人，标本来自我院神经外科。男性18例，女性13例，年龄18～56岁，平均21.77岁。 1.2 胶质瘤组 41例胶质瘤标本来自2008年6月至2011年12月本院的住院和门诊患者，其中垂体瘤11例, 脑膜瘤9例, 神经鞘瘤8例，听神经瘤13例;均经临床诊断和病理诊断确诊。男性23例，女性18例，年龄16～83岁，平均45.21岁。 1.3 材料 Human G-protein coupled receptor 56(GPR56) ELISA kit购自CUSABIO公司，BOTEK Elx800型酶标仪购自美国BioTek公司。 1.4 双抗体夹心间接ELISA法的建立 　检测GPR56 ELISA夹心法的法建立参阅文献。在预包被GPR56特异性抗体的微孔板上，每孔加100ul的标准和样品。盖上提供的胶条，37℃温育2h，不洗。每孔加100mu;l生物素抗体（1倍），37℃温育1h。吸出的各孔，洗涤，共洗涤三次。重复该过程两次，洗净每孔。板倒置和对干净的纸巾。每孔加100mu;l的辣根过氧化物酶-抗生物素蛋白（1times;），37℃温育