王金发第七章课件.pptVIP

CHAPTER 7 ;;OUTLINE;7.1 线粒体的形态;Organization and Function of Mitochondria;? 线粒体的发现与功能研究 ◆1885年,Rudolph K?lliker的研究工作 ◆1900年，Leonor Michaelis的研究工作 ◆Arbert Claude采用盐法分离技术分离到线粒体 ◆1948年George Hogeboom等采用蔗糖介质分离有活性的线粒体;7.2 线粒体结构与化学组成;?外膜(outer menbrane) ◆标志酶:单胺氧化酶; ◆外膜含有较大的通道蛋白:孔蛋白; ?内膜(inner membrane) ◆线粒体进行电子传递和氧化磷酸化的部位,通透性差; ? ◆含有大量的心磷脂(cardiolipin), 心磷脂与离子的不可渗透性有关; ◆内膜的标志酶是细胞色素氧化酶; ◆3类酶;?膜间隙(intermenbrane space) ◆标志酶:腺苷酸激酶 ◆功能:建立电化学梯度 ?线粒体基质(matrix) ◆标志酶:苹果酸脱氢酶 ◆功能: ? ●生化角度: ●细胞生物学角度: ;细菌外膜中的孔蛋白;线粒体膜通透性实验;线粒体组分的分离;线粒体内外膜的分离;线粒体膜的运输系统;线粒体的钙调节作用;◆线粒体各部分的蛋白 质来自何方? ◆定位机理如何?;不同类型核糖体合成的蛋白质;九九年诺贝尔医学奖得主-布洛贝尔;7.3.1 前导肽(leading peptide) ?蛋白质的两种运输方式 ◆细胞质中的核糖体在合成蛋白质时有两种可能的存在状态∶ ●游离核糖体(free ribosome)； ●膜旁核糖体(membranous ribosomes)。;◆蛋白质的两种运输方式 ●翻译后转运 (post-tranlational translocation) ●共翻译转运 (co-translational translocation);细胞质核糖体的蛋白质合成与去向;游离核糖体合成蛋白质的去向;?前导肽与信号肽 ◆前导肽(leading peptide) 导向序列、导向信号、转运肽 ◆信号肽(signal peptide);◆前导肽的性质 ●长约20-80个氨基酸，通常带正电荷的碱性氨基酸(特别是精氨酸和赖氨酸)含量较为丰富; ●序列中不含有或基本不含有带负电荷的酸性氨基酸，并且有形成两性(既亲水又疏水)α螺旋的倾向。;●需要消耗能量; ●需要分子伴侣。 ◆前导肽的特异性 ●具有细胞结构的特异性 ●前导肽的不同片段含有不同的信息;双导向序列;◆如何证明前导肽引导 蛋白质进入线粒体?;◆实验设计 ●分离线粒体 ●与具有线粒体基质定 位信号的前体蛋白温育 ●胰蛋白酶处理;线粒体蛋白定位的实验;7.3.2 线粒体蛋白定位;◆mitochondrial matrix protein;线粒体膜间间隙蛋白保护性寻靶;线粒体膜间间隙蛋白非保护性寻靶;线粒体膜间间隙蛋白寻靶新说;线粒体内膜蛋白定位的三种途径;?外膜蛋白的定位 运送到外膜的蛋白质没有导 肽, 它的氨基酸末端延伸部分就 有识别受体的功能,直接插入到外 膜。;7.4 线粒体的功能:氧化磷酸化作用;?葡萄糖酵解生成丙酮酸 细胞质中的葡萄糖(或糖原)在一 系列酶的催化下生成丙酮酸的过程成 为糖酵解(glycolysis)。;糖的酵解与氧化;?线粒体基质中乙酰辅酶A的生成 ◆丙酮酸跨膜进入线粒体基质； ◆在丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase)作用下氧化成乙酰辅酶A。;乙酰辅酶A的生成;●生物需要能量时首先利用多糖; ●必要时也会利用脂肪: ▲脂肪被水解生成脂肪酸; ▲脂肪酸能够进入线粒体基质，通过β氧化途径(β-oxidation pathway)循环氧化生成乙酰辅酶A。;β氧化;?三羧酸循环 (tricarboxylic acid cycle, TCA) 又叫Krebs循环、柠檬酸循环。;三羧酸循环;7.4.2 呼吸链与电子传递;几种辅酶的结构;?呼吸链(respiratory chain) ◆又称电子传递链,是四种复合物组成的复合体 ◆功能是参与对还原型辅酶的氧化 ●H+的传递 ●电子传递;The Electron Transport Chain;●Complex I NADH-coenzyme Q reductase ●Complex Ⅱ succinate-coenzyme Q oxidoreductase) or succinate dehydrogenase ●Complex Ⅲ(Cytochr