凝胶电泳在医学上的应用.ppt

凝胶电泳在医学上的应用 临床五班 李银 摘要 凝胶电泳种类很多，它已深入到医学的好多领域而且有着广泛的应用。下面我简单说以下几种常用凝胶电泳技术在医学上的应用。并以聚丙烯凝胶电泳为例说一下基本原理和操作步骤。 关键词 凝胶电泳 聚丙烯酰胺 琼脂糖 淀粉 盘状 电泳的分类 琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖凝胶血清蛋白电泳在多发性骨髓瘤诊断方面有着应用 核酸类物质的分离、鉴定是采用琼脂糖凝胶电泳进行的 淀粉凝胶电泳 应用淀粉凝胶电泳鉴定西甜瓜杂交种纯度的研究 梯度凝胶电泳 变形梯度凝胶电泳是一项适用于检测基因点突变以及双链DNA分子小片段缺失和几个碱基对插入的技术。 聚丙烯酰胺凝胶电泳 ▽加入十二烷基磺酸钠去测定蛋白质的相对分子量。 PAGE可用于置备少量的纯度高、有活性的生物大分子。 具备只分离相差1个核苷酸的不同DNA片断的特性，是DNA序列分析的关键 非变性的PAGE分离和纯化双链DNA。 * * ★ 用淀粉凝胶，琼胶，或聚丙烯酰胺等凝胶作为载体，则称为凝胶电泳。 盘状电泳 不连续凝胶 梯度凝胶电泳 梯度孔径凝胶 聚丙烯酰胺凝胶电泳 聚丙烯酰胺 淀粉凝胶电泳 淀粉 琼脂糖凝胶电泳（免疫电泳） 琼脂（糖）凝胶 名称 凝胶 水平式琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术用于检测DNA浓度、纯度及分子量。 分离、测定核酸分子质量时也可采用琼脂糖-聚丙烯酰胺凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析。 变形聚丙烯酰胺凝胶法电泳可用于单链DNA、寡核酸片段以及蛋白质亚基、膜蛋白、肽类等物质的分析，还可以用于研究大分子物质的折叠结构等方面。 聚丙烯酰胺凝胶聚焦在蛋白质的等位点测定、纯度分析以及置备电泳纯样品等方面已得到较广泛的应用，电泳对于在等电位时发生沉淀或变性的样品却不适用。 用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离、分析细菌质粒的闭环DNA开环DNA以及分子质量不等的RNA片段。 既可用于小量样品的分离、鉴定，也适用于较大量样品的分离制备。可用于蛋白质和核酸等分子生物大分子的分离定性及分子量的测定，也用于核酸序列分析。 基本原理： （1）聚丙烯酰胺和交联级亚甲基双丙烯酰胺交联聚合而成，常用两种聚合方式，即化学聚合和光聚合。 （2）凝胶孔径大小与交联度有关系。 （3）蛋白质点电荷差异与分子差异对迁移率有影响。 （4）不连续体系凝胶电泳的原理。 （5）电泳过程。 （6）不连续系统能使样品浓缩，具有高分辨率，但也有一些缺点。