实验三、细胞传代与冻存.pdfVIP

2008-10-03 9:14:35 验三、细胞的传代与冻存 19 页 第 1 页 2008-10-03 9:14:37 l1.细胞培养中为什么添加血清？ l2.使用血清需注意哪些方面？ l3. 消化液胰酶的浓度是多少？ l4.使用小滤器过滤要注意哪些？ 19 页 第 2 页 2008-10-03 9:14:39 针头滤器使用应注意的问题 1.拧紧滤器 2. 注射器吸液体 3. 注射器插好滤器 4.对着烧杯慢推压针芯看是否漏 5.如不漏对小瓶过滤。 6. 滤器放在小瓶瓶口上，取下针头再吸液 体，反复多次，滤完。 7.检查滤器滤膜是否完好。 19 页 第 3 页 2008-10-03 9:14:39 一、 验原理 细胞贴壁过程 19 页 第 4 页 2008-10-03 9:14:40 培养细胞一代生长过程 19 页 第 5 页 2008-10-03 9:14:40 什么时 传代？ 19 页 第 6 页 2008-10-03 9:14:41 19 页 第 7 页 2008-10-03 9:14:41 细胞消化的最佳程度 19 页 第 8 页 2008-10-03 9:14:41 细胞冻存 要求 冻存条件 操作要点 19 页 第 9 页 2008-10-03 9:14:42 二、实验目的 掌握无菌操作技术。 掌握传代细胞的培养的一般方法与步骤。 掌握 养细胞的消化方法。 了解在倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态和 生长状况。 19 页 第 10 页 2008-10-03 9:14:43 三、实验材料及设备 1. 细胞 人宫颈癌HeLa 细胞 人胃癌BGC-823细胞 2. 试剂 胰酶、DMEM培养基、血清、DMSO、抗生素 3. 仪器 超净工作台、CO 培养箱、倒置相差显微镜 2 4.其它用品： 培养瓶，试管，移液管，巴斯德吸管，废液 缸，75％酒精棉球，酒精灯 19 页 第 11 页 2008-10-03 9:14:44 四、实验步骤 1.准备：超净工作台紫外线处理30 分钟,