自制多器官保存液(AMU)对兔肾脏低温保存期间对Na+-K+-ATP酶的影响.docVIP

精品论文 参考文献 自制多器官保存液(AMU)对兔肾脏低温保存期间对Na+-K+-ATP酶的影响 自制多器官保存液(AMU)对兔肾脏低温保存期间对Na+-K+-ATP酶的影响 　　张恩浩1 刘东明2 董秀哲1 　　（1 延边大学附属医院泌尿外科 133000） 　　（2 内蒙古通辽市人民医院泌尿外科 028000） 　　【摘要】目的：研究自制多器官保存液（AMU)对兔肾低温保存期间对Na+-K+-ATP酶的影响。方法 建立兔离体肾脏单纯低温保存模型。结果 兔肾随着低温保存时间的延长，肾皮质匀浆两组Na+-K+-ATP酶活性均出现降低趋势，保存24h和48h,Na+-K+-ATP酶活性，两组保存液比较无明显差异(Pgt;0.05)，保存72h,AMU液组Na+-K+-ATPase活性明显高于HCA液组，具有显著差异(Plt;0.05)。结论 AMU保存液对兔肾低温保存期间在提高Na+-K+-ATP酶活性方面显著优于HCA保存液。 　　【关键词】器官保存液 肾 Na+-K+-ATP酶 兔 　　【中图分类号】R692 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）50-0264-02 　　目前，器官保存液的种类很多，各种保存液也各有优缺点。我们在吸取国内、外器官保存液优点的基础上，配制了多器官保存液AMU（ATP-MgCl2 Urokinase Solution），并通过离体兔肾低温保存实验检测其保存效果。 　　1.材料和方法 　　1.1 材料 ①器官保存液 自制多器官保存液（AMU液）的组成主要包括：乳糖醛酸（100mmol/L）、三磷酸腺苷二钠(5mmol/L)、氯化镁（5mmol/L）、磷酸二氢钾（25mmol/L）、蔗糖(60mmol/L)、低分子右旋糖酐-60（50g/L）、还原型谷胱苷肽（3mmol/L）、尿激酶（2万单位/L）、地塞米松（20mg/L）、异搏定(20mg/L)、氢氧化钾（100mmol/L）等，pH调到7.40。离体肾脏保存液(HCA液)：HC-A液由上海长征医院制剂室生产，购于吉林大学第一医院泌尿外科。②实验动物及分组：实验家兔18只，随机分为HCA液组和AMU液，每组9只，各组再随机均分成三小组，分别为保存24,48,72小时组。术前禁食16h，禁水12h。家兔称重后，戊巴比妥20mg/kg经耳静脉注射麻醉家兔，再注射肝素3mg/kg，全身肝素化，并建立耳静脉通道。 　　1.2方法 　　1.2.1离体肾脏单纯低温保存模型的建立：实验家兔麻醉成功后，仰卧位固定于实验台???。腹部备皮，用碘伏消毒胸腹部，铺手术巾单，取上腹部正中切口，上至剑突，下至耻骨上方，经腹白线进入腹腔。在髂血管分叉处上方1.0cm处分离腹主动脉和下腔静脉。剪开腹主动脉后置入排好气的连有40C灌注液的细硅胶管后结扎固定，结扎其下方的腹主动脉阻断血流。在肾动脉上方游离腹主动脉并在腹腔干起始部上方阻断腹主动脉近端之，钳夹阻断肠系膜上动、静脉，开放腹主动脉灌注管的控制夹进行肾脏的灌注的同时，剪开已分离出的下腔静脉放出灌注液。灌注压力：腹主动脉为90cmH2O,灌洗液量大约500ml左右，灌洗液速度不少于200滴/min,基本成直线，直至流出液清澈无血，灌洗肾脏降温冷却，表面颜色呈均匀苍白为止，立即切取双侧肾脏，立即置入盛有40C、200ml保存液的烧杯内，用消毒好的塑料薄膜封口后，放入冰箱内保存，保存温度为40C。并按时切取肾脏标本。上述灌注液和保存液为同一液体，即AMU液和HCA液。 　　1.2.2肾脏标本取样时间及部位和规格：在肾脏低温保存24、48、72小时后，按标本时间分组取肾实质标本。取材部位：标本均取自兔左右肾脏矢状线中点处的肾实质，重约3～4g。 　　1.3统计学处理：采用SPSS11.0软件进行统计学处理，测定值以均值plusmn;标准差表示，同一时点两组间比较采用t检验，Plt;0.05为差异有统计学意义。 　　2.结果 　　低温保存期间，AMU液组和HC-A液组Na+-K+-ATP酶活性均出现降低趋势，保存24h和48h,Na+-K+-ATP酶活性，两液体组无明显差异(Pgt;0.05)；保存72h,AMU液组Na+-K+-ATP酶活性明显高于HC-A液组，显著差异具有统计学意义(Plt;0.05)。 　　保存期间肾皮质Na+-K+-ATP酶(U/mgprot)活性变化（n=7, -xplusmn;SD） 　　3.讨论 　　Na+-K+-ATP酶又称为钠泵，目前认为，Na+-K+-ATP酶不仅是一种存在于细胞膜上的载体蛋白，也是一种P2型ATP酶。