选修3选修3.2.2动物细胞工程.pptVIP

1.其由何种细胞产生？ 2.主要分布在哪里？ 3.如何得到抗体？ 提问 ？ 单克隆抗体 Q1：什么是抗体？如何产生的？ Q2：一种抗原刺激能产生几种抗体？ 抗体：由B细胞分化成的浆细胞产生的免疫球蛋白，它能识别抗原的某一特定位点。 单克隆抗体 侵入 抗体2 抗体1 对于一个抗原刺激，每一个淋巴细胞都会合成并分泌一种单个的抗体，这些抗体可以高度特异地识别免疫抗原的特定区域，也就是抗原决定簇。 由于一个抗原通常都有几个不同的抗原决定簇，因此每个免疫淋巴细胞都可能产生一种针对某一个抗原决定簇的抗体，由同一抗原能产生多种不同的抗体。 抗原 B细胞 抗原 动物体内 刺激 效应B 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一效应B细胞 不能增殖产生大量抗体 2.产量低、纯度低。 1.特异性差、反应不够灵敏； 普通抗体的特点 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 化学性质单一、特异性强的抗体。 杂种细胞 单克隆抗体设计思路 ？ ？ 诱导其融合的方法有哪些？ 抗原 效应 B细胞 单克隆抗体制备过程 ？ ？ 抗原 效应 B细胞 筛选 筛选 AA型、BB型 AB型杂交瘤细胞 能产生所需抗体的细胞 杂交瘤细胞 诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点 注射抗原的目的是什么 为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选 大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法 骨髓瘤细胞 体外培养 从培养液中获取 抗原 淋巴细胞 体内培养 从腹水中提取 单克隆抗体 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 2、原理： B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 B-B细胞 B-瘤细胞 瘤-瘤细胞 选择培养 杂交瘤细胞（ B-瘤细胞） 克隆化培养 抗体检测 杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 (一)获得杂交瘤细胞 (二)动物细胞培养 (三)提取抗体 杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，既能迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。 单克隆抗体制备过程 单克隆抗体的应用 ①在基础理论研究中具有重要意义； ②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有 特异性高、灵敏度高等优越性； ③“生物导弹”。 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ） 　 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 A 课堂练习 2. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（ ） A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D 一种诱导细胞融合的新方法 一种新细胞 灭活病毒 杂交瘤细胞 一个优势 单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势 专题2 细胞工程 第2节 动物细胞培养和核移植 技术 提问： 植物细胞工程包括哪些方面？ 1.植物组织培养 2.植物体细胞杂交 动物细胞工程包含哪些方面： 1.动物细胞培养 2.动物细胞融合 3.单克隆抗体 4.核移植 Ⅰ Ⅰ Ⅱ Ⅱ Ⅱ 1.概念： 从动物机体内中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬浮液 细胞贴壁，出现接触抑制 细胞增殖能力强 无限传代 去掉组织间蛋白 （接触抑制） 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 遗传物质 未变 （10代—50代） 遗传物质 改变 不死性 动物细胞培养过程 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养（消化后的初次培养） 传代培养（分瓶后的培养） 如何界定原代培养和传代培养； 遗传物质改变 动物细胞培养过程 2. 动物细胞培养液的主要成分： 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 与植物培养基相比其特点是： （1）液体培养基 （2）含有动物血清 动物体细胞大都生活在液体的环境 动物细胞培养条件 4. 气体环境：___________。 添加一定量的抗生素，定期更换培养液。 3. 温度和PH：____________________