选修3选修3.2.2动物细胞工程动物细胞培养和核移植技术.pptVIP

二、单克隆抗体 问题1、什么是抗体？如何产生的？ 问题2、一种抗原刺激能产生几种抗体？ 抗体：由B细胞产生的免疫球蛋白，它能识别抗原的某一特定位点。 抗体 1。抗原 动物体内 刺激 效应B 抗原 动物体内 刺激 效应B 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一效应B细胞 不能增殖产生大量抗体 2。特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏 侵入 抗体2 抗体1 对于一个抗原刺激，每一个淋巴细胞都会合成并分泌一种单个的抗体，这些抗体可以高度特异地识别免疫抗原的特定区域，也就是抗原决定簇。 由于一个抗原通常都有几个不同的抗原决定簇，因此每个免疫淋巴细胞都可能产生一种针对某一个抗原决定簇的抗体，由同一抗原能产生多种不同的抗体。 抗原 B细胞 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 -化学性质单一、特异性强的抗体。 杂种细胞 ？ ？ 诱导其融合的方法有哪些？ 抗原 效应 B细胞 2.制备过程： ？ ？ 抗原 效应 B细胞 筛选 筛选 AA型、BB型 AB型杂交瘤细胞 能产生所需抗体的细胞 杂交瘤细胞 （一）制备 诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点 注射抗原的目的是什么 为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选 大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法 2、原理： 1、过程 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 B-B细胞 B-瘤细胞 瘤-瘤细胞 选择培养 杂交瘤细胞（ B-瘤细胞） 克隆化培养 抗体检测 杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 (一)获得杂交瘤细胞 (二)动物细胞培养 (三)提取抗体 杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ） 　 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 A 4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（ ） A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D 3.单克隆抗体的应用： ①在基础理论研究中具有重要意义 ②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有 特异性高、灵敏度高等优越性。 ③生物导弹 动物细胞工程(二) 2、单 克 隆 抗 体 制 备 过 程 单克隆抗体的制备过程1.swf 骨髓瘤细胞？ 体外培养 从培养液中获取 抗原？ 淋巴细胞？ 体内培养 从腹水中提取 单克隆抗体 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 这只老鼠身上的“人耳”是由我国科学家曹谊林教授利用细胞工程技术复制出来的。 动物细胞培养技术应用 克隆器官：皮肤、耳朵 检测有毒物质 细胞治疗：干细胞 蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、酶、激素、生长因子、单抗 单抗的应用和特点 诊断、治疗和预防疾病 治疗癌症等病（生物导弹） 特异性强、灵敏度高、纯度高 应用 一种诱导细胞融合的新方法 一种新细胞 灭活病毒 杂交瘤细胞 一个优势 单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势 动物的胚胎移植 解决某些妊娠时间长、每胎产子数量少的优良种畜的繁殖速度问题。 动物细胞培养过程 动物细胞培养液中含葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 细胞大都取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 将组织取出来后，先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞，然后配制成一定浓度的细胞悬浮液，再将该悬浮液放入培养瓶中，在培养箱中培养，这个过程称为原代培养。 随着细胞的生长增殖，培养瓶中的细胞越来越多，需要定期地用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中培养，这称为传代培养。 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的全能性 细胞增殖 培养基性质 固体培养基 液体培养基 培养基特有成分 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 培养结果 植物体 细胞株、细胞系 培养目的 快速繁殖、培育无病