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利用免疫共沉淀验证肌纤维形成相关蛋白CFL2与MEF2C的相互作用
·80 · Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2015 Vol. 47 No. 9
利用免疫共沉淀验证肌纤维形成相关蛋白 CFL2
与MEF2 C 的相互作用
*
, , ,
许晶 朱弘焱 田玉民 苏玉虹
( , 121000)
辽宁医学院畜牧兽医学院 辽宁锦州
摘要: (CFL2) - 2 (MEF2C) 。 (GFP)
利用免疫共沉淀技术验证丝切蛋白 和肌细胞增强因子 之间的相互作用关系 构建带绿色荧光蛋白 的
pEGFP - N - CFL2 pLenti6. 3_ MCS_ IRES2 - EGFP - his - MEF2C , ,
1 和 重组载体 经双酶切鉴定正确后 分别将上述重组载体共转染至人宫颈癌细
(Hela), CFL2 MEF2C 。 ,pEGFP - N - CFL2 pLenti6. 3_ MCS_ IRES2 - EGFP -
胞 利用免疫共沉淀方法验证 和 之间的相互作用关系 结果表明 1 和
his - MEF2C Hela , CFL2 MEF2C , MEF2C CFL2 Western blot ,
重组载体共转染 细胞 分别用抗 和抗 抗体沉淀蛋白复合物 用 和 抗体进行 检测 检测到
pLenti6. 3_ MCS_ IRES2 - EGFP - his - MEF2C pEGFP - N - CFL2 。 pEGFP - N - CFL2 pLenti6. 3_ MCS_ IRES2 -
和 1 的表达 本试验成功构建 1 和
EGFP - his - MEF2C , Hela CFL2 MEF2C 。
真核表达重组载体 在 细胞中表达后利用免疫共沉淀的方法证实了 和 之间存在相互作用
关键词:CFL2 ;MEF2C ; ; ;
载体构建 相互作用 免疫共沉淀
中图分类号:Q786 文献标志码:B 文章编号:0529 - 5130 (2015)09 - 0080 - 04
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