消痰散结方体外诱导人结直肠癌HcT116细胞周期阻滞的作用及相关.PDFVIP

·７４· 上海中医药杂志 ２０１６年第５０卷第２期 ＳＨ．Ｊ．ＴＣＭＦｅｂ．，２０１６；Ｖｏｌ．５０Ｎｏ．２ ＤＯＩ：１０．１６３０５／ｊ．１００７１３３４．２０１６．０２．０２４ 消痰散结方体外诱导人结直肠癌 ＨＣＴ１１６细胞 周期阻滞的作用及相关机制研究 １，２ １ １ １ 周昱岐 ，张映城 ，魏品康 ，叶　敏 １．第二军医大学附属长征医院中医科（上海　２００００３）；２．解放军第１０１医院血液肿瘤科 （江苏　无锡　２１４０４４） 【摘要】　目的　观察消痰散结方对结肠癌细胞株细胞周期分布的影响，并探讨其相关机制。方法　消痰散结方浸膏冻干粉末溶解 在细胞培养液中，制备消痰散结方保存液。体外以不同浓度消痰散结方（０．２４ｇ／Ｌ、０．４７ｇ／Ｌ、０．９４ｇ／Ｌ、１．８８ｇ／Ｌ）作用于ＨＣＴ１１６细 胞７２ｈ后，流式细胞仪检测细胞周期分布；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测药物干预后细胞周期蛋白（ｃｙｃｌｉｎＡ２、ｃｙｃｌｉｎＢ１）和细胞周期蛋白依赖 性激酶蛋白（ｃｙｃｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ，ＣＤＫ２、ＣＤＫ１）的表达变化。结果　消痰散结方作用ＨＣＴ１１６细胞７２ｈ后，０．４７ｇ／Ｌ、０．９４ｇ／Ｌ组 Ｓ期细胞比例增高，０．４７ｇ／Ｌ、０．９４ｇ／Ｌ、１．８８ｇ／Ｌ组Ｇ期细胞比例增高，与对照组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。消痰散结方作 ２ 用７２ｈ后，０．２４ｇ／Ｌ、０．４７ｇ／Ｌ、０．９４ｇ／Ｌ、１．８８ｇ／Ｌ组ＣＤＫ２、ｃｙｃｌｉｎＡ２、ＣＤＫ１表达显著降低，０．４７ｇ／Ｌ、０．９４ｇ／Ｌ、１．８８ｇ／Ｌ组ｃｙｃｌｉｎＢ１ 表达显著降低，与对照组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１），且效应呈浓度依赖性。结论　消痰散结方对ＨＣＴ１１６细胞增殖的抑制作 用是通过下调ｃｙｃｌｉｎＡ２、ｃｙｃｌｉｎＢ１和ＣＤＫ２、ＣＤＫ１的表达，使ＣＤＫ２／ｃｙｃｌｉｎＡ２、ＣＤＫ１／ｃｙｃｌｉｎＢ１复合体活性减弱，阻滞细胞周期于Ｓ和Ｇ ２ 期实现的。 【关键词】　 结直肠癌；消痰散结方；细胞周期 Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆ“ＸｉａｏｔａｎＳａｎｊｉｅＲｅｃｉｐｅ”ｉｎｉｎｄｕｃｉｎｇｃｅｌｌｃｙｃｌｅａｒｒｅｓｔｏｆｈｕｍａｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ ＨＣＴ１１６ｃｅｌｌｌｉｎｅａｎｄｔｈｅｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍ １，２ １ １ １ ＺＨＯＵＹｕｑｉ ，ＺＨＡＮＧＹｉｎｇｃｈｅｎｇ，ＷＥＩＰｉｎｋａｎｇ，ＹＥＭｉｎ １．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣｈａｎｇｚｈｅｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ， ２００００３；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅｍａｔｏｌｏｇｙａｎｄＯｎｃｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ１０１ｔｈＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＴｈｅＰｅｏｐｌｅ’ｓＬｉｂｅｒａｔｉｏｎＡｒｍｙ，Ｗｕｘｉ， Ｊｉａｎｇｓｕ，２１４０４４ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆ“ＸｉａｏｔａｎＳａｎｊｉｅＲｅｃｉｐｅ”ｏｎｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅ，ａｎｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｌ“ＸｉａｏｔａｎＳａｎｊｉｅＲｅｃｉｐｅ”ａｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕｔｉｏｎｗａｓｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ，ｗｅｉｇｈｔｅｄａｎｄｄｉｓｓｏｌｖｅｄｉｎｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｓｔｏｒｅｄ．ＨＣＴ１１６ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆ“ＸｉａｏｔａｎＳａｎｊｉｅＲｅｃｉｐｅ”ｆｏｒ７２ｈ，ｃｅｌｌｃｙｃｌｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓ （ｃｙｃｌｉｎＡ２，ｃｙｃｌｉｎＢ１，ＣＤＫ２ａｎｄＣＤＫ１）ｗｅｒｅｄｅｔｅ