非洲爪蟾血清白蛋白的分离纯化及胰蛋白酶抑制活性-Zoological.PDFVIP

维普资讯 动 物 学 研 究 2005，Dec．26 (6)：622—626 CN 53—-1040／Q ISSN 0254—-5853 ZoologicalResearch 非洲爪蟾血清 白蛋白的分离纯化及胰蛋 白酶抑制活性 张英霞 一，李文辉 ，张 云1． (1．巾 科学院昆明动物研究所 毒素研究室，云南 昆明 650223；2．中国科学院研究生院，J匕京 100039) 摘要：通过凝胶过滤层析及两步阴离子交换层析，从非洲爪蟾 (Xenopuslaevis)的血清中获得了其 68kDa 的血清 白蛋 白。与大蹼铃蟾血清 白蛋白相似，非洲爪蟾血清 白蛋 白也具有抑制胰蛋白酶的活性 ，但其抑制活力 相对较低，180nmo1／L的非洲爪蟾血清 白蛋 白能抑制 84％的胰蛋 白酶活性 (30nmol／L)。经表面等离子共振法 获得了其与胰蛋白酶的结合动力学常数，解离平衡常数KI 1．44X10一mol／L。经 Westernblot分析发现，非洲 爪蟾的皮肤中也分布有血清 白蛋 白。推测两栖类动物血清 白蛋 白具有的胰蛋白酶抑制活性可能是其抵御天敌捕 食的一种防御措施。 关键词 ：两栖类；非洲爪蟾；血清 白蛋 白；胰蛋 白酶抑制剂 中图分类号：Q959．5；Q512 文献标识码 ：A 文章编号：0254—5853 (2005)06—0622—05 Purification andTrypsin InhibitoryActivity ofXenopuslaevisSerum Albumin ZHANG Ying—xiat2，LEEVVen—hUi，ZHANG Yunt f1．DepartmentofAnirmdToxinolog)，KunmingInstituteofZoolog)，theChineseAcademyofSciences，Kunming，Yunnan 650223，China 2．GraduateSchooloftheChineseAcadem)ofSciences，Beijing 100039，China) Abstract：Frogalbumin (XpA—serum)waspurifiedfrom senlmofXenopaslaevisbyacombinationofgelfiltration andionexchangechromatographysteps．LikeBombinamaximaalbumin，XpA—serum exhibitedtrypsininhibitory activity， whichwaslowerthanthatofB．maxima albumin．XpA—seurm attheconcentrationof180nM inhibited84％ activityof trypsin(30nM)．Theequilibriumdissociationconstants(KD)is1．44X10～MasdeterminedbySurfacePlasmonReso— nance．W estern blotanalysisrevealedthatXpA—seurm wasalsodistributedintheskin．Itisdeducedthatserum albumin ofamphibianpossessingtrypsininhibitoryactivitycanfunctiondirectlyorindirectlyasade~nsivesubstanceagainstpreda— tops． Keywords：Amphibian；Xenopuslaevis；Seurm albumin；Trypsininhibitor 血清白蛋 白是脊椎动物血浆 中含量最丰富的蛋 HSA由3个序列相似的结构域 (工一H1)组