玉米花粉多糖对鸡新城疫弱毒疫苗免疫应答的影响.pdf

中国兽医杂志980133 中国兽医杂志 科技期刊 CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE 1998年 第1期 No.1 January 1998 玉米花粉多糖对鸡新城疫 弱毒疫苗免疫应答的影响※ 屈洪岩①　郭玉璞②　陆　钢②　吕艳丽②　黄　毅③　戴丽梅④ 　　90年代，人们越来越重视多糖的生物活性及其药用价值，在对蜂花粉的药物活性 1 3 及其花粉多糖的应用前景上，受到人们普遍的关注 ［～ ］。陈诗芸、陈德芳等研究破 壁或未破壁花粉是防治病毒性疾病有效药物的增效剂。主要是花粉中的“免疫多 糖”影响机体网状内皮系统巨噬细胞、淋巴细胞、白细胞、RNA 、DNA 、蛋白质的合 成、抗体的生成、cAMP与cGMP 的含量、补体的生成以及对干扰素的诱生作用，它使 4 机体巨噬细胞和吞噬功能剧增，从而使有效药物达到相乘或平方、立方倍增的作用 ［ 6 ～ ］。花粉多糖作为免疫增强剂应用在畜牧兽医上，有它发展的潜力。新城疫是危害 鸡群的急性传染病，在生产实践中一些免疫增强剂普遍应用于灭活疫苗，而应用于弱 毒疫苗的免疫增强剂尚未见报道。本研究依据花粉多糖的生物活性和药理作用，以及 7 8 玉米花粉中多糖含量较高的文献报道 ［， ］，按照不同剂量配合新城疫弱毒疫苗共同 免疫，从中筛选最佳剂量，寻找理想的免疫增强剂，为应用提供理论依据。报道如 下。 1　材料和方法 1.1　材料 1.1.1　ND浓缩抗原与新城疫克隆30弱毒疫苗均由中国农业大学实验动物研究所提供。 抗原血凝效价为1∶1024。 1.1.2　磷酸缓冲液pH7.2、1%鸡红细胞液、5%枸橼酸钠、0.06%台盼蓝溶液均由自己配 制。 1.1.3　细胞增殖ELISA　Brdu显色试剂盒，购于东方科技公司德国宝灵曼。 1.1.4　植物血球凝集素(PHA)，RPMI1640培养基，均购于中国农业大学供应科。 1.1.5　玉米花粉购于北京市蜂业公司，玉米花粉多糖由自己提取，配制成5%多糖水溶 液，经巴氏灭菌后供实验用。 1.1.6　96孔“V”型血凝板、96孔组织培养板均购于格瑞恩公司。 file:///F|/qk/zgsyzz/980133.htm（第 1／7 页）2009-12-23 9:44:43 中国兽医杂志980133 1.1.7　酶标分析仪511型，DG3022型。 1.1.8　可调微量移液器。 1.1.9　高效液相色谱仪LKB ，瑞典，中国农业大学食品检测中心。 1.1.10　ZFQ85型旋转蒸发器，上海医械专机厂生产。 1.1.11　透析带，ψ75DM，购于北京百泰生化技术公 　　 司。 1.1.12　高速离心机。 1.1.3　实验动物，伊莎雏鸡，500只，雄性，1日龄。 1.2　方　法 1.2.1　多糖的测定　由中国农业大学食品监测中心，应用高效液相色谱仪测得玉米花 粉多糖含量为73%，分子量大于4万。 1.2.2　实验设计 1.2.2.1　免疫途径　新城疫克隆30弱毒疫苗皮下注射，玉米花粉多糖溶液胸肌注射。 1.2.2.2　实验分组　将依莎雏鸡分为5组，7 日龄时进行首免，处理组同时用玉米花粉多 糖溶液胸肌注射，对照组用蒸馏水胸肌注射。分组如下。 　　A组(5%玉米花粉多糖组) ：A 1：0.2ml/只(10mg)，疫苗皮下注射0.1ml/只，40只； A2 ：0.1ml/只(5mg)，疫苗皮下注射0.1ml/只，40只；A3 ：0.1ml/只(5mg)，疫苗皮下注 射0.05ml/只，40只；A4 ：5%多糖溶液代疫苗，稀释液0.1ml/只皮下注射，40只。B组 (对照组) ，蒸馏水0.1ml/只胸肌注射，疫苗皮下注射0.1ml/只，共40只。 1.2.3　方法与步骤 分离血清，采用β-微量血凝抑制实验测定HI抗体效价。以组为单位求其平均值，数据 ［9］