高速逆流与制备色谱技术在射干有效成分分离中的应用.pdfVIP

高速逆流与制备色谱技术在射干有效成分分离中的应用 高速逆流与制备色谱技术在中药复杂体系分离中的应用 专业：物理化学 申请者：彭翠琳导师：梁勇教授 摘要 高速逆流色谱(HSCCC)是一种不用任何同态载体的液、液色谱技术，分离效率高， 产品纯度高；不存在载体对样品的吸附和污染；制备量大和溶剂消耗少，因而被广泛应用 于中药有效成份的分离。但在以往的研究中存在以下问题：对于中药简单体系经一步高速 逆流分离能得到较好的结果，得到纯品，且制备量大，但面对复杂体系往往得不到纯品， 且耗费大量时间在优化逆流条件上。本文中将高速逆流色谱与制备色谱结合，建立快速分 离中药复杂体系的方法，以射干为研究对象，具体研究内容如下： 分离，从100 mg射干乙酸乙酯粗提物中得到了10mg纯度为94％异鼠李素，8mg纯度为95％ 野鸢尾黄素和7mg纯度为90％刚毛黄酮。 (2)射干正丁醇粗提物部分采用将中低压液相色谱与高速逆流色谱(HSCCC)以及 半制备高效液相色谱(P．HPLC)相结合的方法对其中的有效成分进行分离纯化。由于射 干正丁醇部分物质比较复杂，首先用中低压液相色谱(MPLC)，以AB．8大孔树脂为填料，一 工业酒精为洗脱剂对其进行分段，将正丁醇部分分为三段，分别为10％、15％和20％工业 酒精水溶液洗脱液；然后分别将三部分洗脱液浓缩，取100mg以甲基叔丁基醚：乙酸乙 酯：正丁醇：乙腈：O．1％三氟乙酸水溶液(1：2：1：1：5，VⅣ)作为两相溶剂系统， 用HSCCC进行分离，经HPLC检测，除个别逆流峰纯度较高，所得逆流峰均含两或三个 物质，最后采用半制备高效液相纯化各逆流峰。从射干正丁醇部分共分离得到九种成分， 两种未知，其它分别为：纯度为94．26％的草夹竹桃苷，纯度为98．40％的芒果苷，纯度为 纯度为98．97％的鸢尾甲苷B和纯度为98．58％的异鸢尾苷，其产量分别为0．4mg，2．4 mg， 2．5 mg，0．4mg，1．5mg，0．2mg，0．1mg。 本文中将高速逆流与中低压液相色谱和制备色谱相结合对射干复杂提取物进行分离， 将高速逆流色谱分离速度快，分离量大，回收率高且溶剂系统更换灵活等特点与制备色谱 高速逆流与制备色谱技术在射干有效成分分离中的应用 的高分离度相结合，节约了优化HSCCC两相溶剂体系的时间，弥补一次高速逆流分离不 能得到较多纯品的缺点，以达到快速分离中药复杂体系的目的。 关键词： 中药，射干，高速逆流色谱，有效成分，电喷雾质谱，黄酮类化合物 Ⅱ 高速逆流与制备色谱技术在射干有效成分分离中的应用 APPLICATIoNOFHSCCCAND AND INSEPARATION OF BELAMCANDAE Name：Cuilin Chemistry Major：Physical PengSupervisor：Yongliang ABSTRACT counter-current aformof Hi曲·speed chromatography(HSCCC)isliquidliquid withoutsolidmatrix．Itisefficientin any separation．Theproduct partitionchromatography fromitis isnoneirreversible and of ontothe