第八章-植物种质资源的保存.pptVIP

第八章 植物种质资源的保存 种质(germplasm)是亲代通过生殖细胞或体细胞传递给子代的遗传物质。 植物种质资源(plant germplasm resources)即为携带各种不同遗传物质的植物总称，又称遗传资源或品种资源，包括栽培，野生及人工创造的各种植物的品种或品系。 种质资源保存(germplasm conservation)是指在天然或人工创造的适宜环境条件下，贮存植物种质，使其保持生命力与遗传性的技术。 种质资源保存的必要性： 种质资源或称基因库是选育新品种的最基本的原始材料。 有人说：“人类的命运将取决于人类理解和发觉植物种质资源的能力。” 植物种质资源的多样性由于自然灾害和人为活动受到严重影响，作物品种资源日益匮乏。 第一节 种质资源保存类型 种质资源的保存方式有两种，即原生境保存和非原生境保存。 原生境保存（原地保存）：将植物的遗传材料保存在它们的自然环境中。原生境保存的地方多是植物保护区，另一种方法为农田种植保存。 非原生境保存（异地保存）： 将植物的遗传材料保存在不是它们的自然生境的地方。 非原生境保存方式有植物园、种质圃、 种子(质)库、试管苗库、超低温库等。具体保存方法有四种：种植保存、贮藏保存、离体保存和基因文库保存。 华南植物园 野外保存植物种质资源需要大量的土地和人力资源， 成本高， 且易遭受各种自然灾害的侵袭。 种子库只能保存正常型种子，对于顽拗型、脱水敏感的种子和有性繁殖困难的植物则无能为力，而且种子库仅能保存基因，而不能保存特定的基因型材料。 自1975年Henshaw和Morel 首次提出离体保存(conservation in vitro)植物种质的策略以来，该项技术受到植物界的极度重视。 第二节 种质资源离体保存 种质资源的离体保存(germplasm conservation in vitro)：是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质体等材料，采用限制、延缓或停止其生长的处理措施使之保存，在需要时可重新恢复其生长，并再生植株的方法。 离体保存的意义 可使一些无性繁殖作物种质资源低温长期保存，避免资源的丢失。 节省土地和劳力，方法简单，花费少并能在保存中脱毒。 一旦利用可快速繁殖；也利于种质交换。  （一）低温保存 一种缓慢生长保存方法，是通过控制培养温度（非冰冻低温）来限制培养物各种生长因子的作用，使培养物生长减少到最低限度。 低温保存的植物离体材料类型：试管苗、愈伤组织、花粉、茎尖等。 （二）超低温保存 1.种质资源超低温保存的发展概况 20世纪70年，Nag和Street首先证明胡萝卜悬浮培养细胞在液氮中保存后能恢复生长。 极端低温温度下，活细胞内的物质代谢和生长活动几乎完全停止。因此，细胞、组织和器官在超低温保存过程中不会引起遗传性状的改变，也不会丢失形态发生的潜能。同时，由于超低温条件下，生物的代谢和衰老过程大大减慢，甚至完全停止，因此可以长期保存植物材料。 2.种质资源超低温保存的原理 细胞冰冻结冰保护性脱水理论 常温下，细胞及其溶液处于渗透平衡的状态，当温度降到冰点以下时，首先是细胞外溶液部分“冻结”出冰；胞外溶液的浓度升高，破坏了细胞内外溶液的平衡，水分由胞内通过细胞膜向外渗透，细胞收缩，细胞内浓度提高；当温度不断降低时，冻结和渗透过程不断进行，这种过程称为保护性脱水。 当复温时，温度升高，冻结的冰不断融化，水分由胞外向胞内渗透，使收缩的细胞膨胀，可能恢复原状。 精确控制上述过程，能使细胞在降温、复温、渗透过程中不被损伤而死亡。 溶液的玻璃化理论 溶液在降温时，如果没有均一晶核或晶核生长缺乏足够的时间，就首先形成过冷溶液。继续降温，均一晶核形成。如果降温速度不够快，就形成尖锐的冰晶。降温速度足够快，均一晶核很少或几乎没有形成，或均一晶核生长缺乏足够的时间，溶液就进入无定型的玻璃化状态。它是一种透明的固态，与液态相比，分子没有发生重排，因此与晶态不同。被称为玻璃态，此时的温度叫玻璃化形成温度。在玻璃化形成过程中，既没有溶液效应对细胞的损伤，也没有冰晶的形成对细胞造成的机械伤害。 提高超低温冷冻保存的措施 由于植物细胞含水量比动物细胞高，冰冻保存难度大，如果直接将保存材料放入液氮中，组织和细胞由于细胞内水分结冰，引起组织和细胞死亡，因而，超低温保存的植物材料必须借助于冷冻防护剂(cryoprotectant)。 冷冻防护剂防护机理： 在水溶液中能强烈地结合水分子，水合作用的结果使溶液的黏稠度增加。当温度下降时，溶液冰点下降，即冰的结晶中心增长速度下降，使水的固化程度减弱。因而对于降低培养基冰点和植物组织、细胞冰点起重要作用。 冷冻防护剂的使