第十三章 植物病害诊断3PPT.ppt

第三节 实验室常规诊断 ; 一、真菌病害 病斑上已产生子实体的真菌病害可直接采用显微镜镜检 挑 撕 压 切; 一、真菌病害 对看不到真菌结构的标本保湿培养 适温（20~25oC） 高湿（100%RH） 24~74小时; 二、细菌病害和菌原体病害 观察溢菌现象 但瘤肿病害的组织中菌体较少，观察不到溢菌现象。; 二、细菌病害和菌原体病害 有的细菌（如，韧皮部杆菌属）和植原体病害 扫描电镜下可观察到植物韧皮部细胞内的病原 用四环素类抗菌素灌注植物，病株出现一定时期的恢复，可间接证明是植原体病害。 细菌病害病原的鉴定，必须经分离纯化后，做细菌学性状鉴定。; 三、病毒病害 鉴别寄主诊断; 四、线虫病害 分离收集线虫 植物器官外表、内部直接挑取 简单的漏斗分离方法获得 显微镜下辩认植物寄生线虫 具有吻针而区别于非寄生性线虫;第三节 柯赫氏法则（Kochs Rule） ; 二、柯赫氏法则 1. 在任何病植物体上都能发现同一种致病的微生物，并诱发一定的症状； 2. 必须能从病组织中分离出这种微生物，获得纯培养，并且明确它的特征； 3. 用纯培养物接种到相同品种的健康植株上可以产生相同病害症状（同1）； 4. 从接种发病的植物上重新分离到这种微生物（2）。 ; 柯赫氏法则一般是适用证明植物病原细菌、病原真菌的致病性。 专性寄生真菌、病毒等活养生物的致病性、以及非生物因素的致病，就很难严格遵守法则。 实践中，原则上遵循柯赫氏法则，并作恰当调整，完成证病。 植物病毒的证病，以提纯的病毒代替纯培养物； 白粉菌的证病，用离体叶片段上培养的孢子代替纯培养物。; 植物线虫病害用分离的线虫代替纯培养物 有的线虫是植物病害的病原； 有的是其他病原物的传播媒介； 有的是和其他病原物共同作用形成复合侵染病害； 有的只是造成伤口，为其他病原物侵染提供条件； 应用柯赫氏法则弄清线虫在植物病害中的作用。;第四节 植物病害的针对性检测 ;二、噬菌体诊断;三、血清学诊断 1. 概 念;2、凝集反应 颗粒性抗原（细菌）与其特异性抗体在电解质影响下，很快结合成可见的凝集块。 ;2、琼脂双扩散 在一定浓度的琼脂凝胶中，抗体和抗原互相扩散，在适当的位置形成沉淀，沉淀线的形状可以反映抗原和抗体的相互关系。 ; 抗体夹心ELISA;四、核酸杂交及PCR诊断技术 ;