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竞赛——生物化学--青少年教育精选.ppt
影响迁移速率的主要因素: 分子所带净电荷(环境pH ) 分子的大小 分子的形状 * (3)根据蛋白质电荷不同的分离方法 b. 离子交换层析(ion-exchange chromatography) * ※ 草酰乙酸转运出线粒体 (苹果酸穿梭) 出线粒体 苹果酸 苹果酸 草酰乙酸 草酰乙酸 苹果酸通过线粒体膜的二羧酸转动系统与其他二羧酸或磷酸盐交换而离开线粒体 2. 1,6-双磷酸果糖 转变为 6-磷酸果糖 1,6-双磷酸果糖 6-磷酸果糖 Pi 果糖双磷酸酶 3. 6-磷酸葡萄糖水解为葡萄糖 6-磷酸葡萄糖 葡萄糖 Pi 葡萄糖-6-磷酸酶 非糖物质进入糖异生的途径 ⑴ 糖异生的原料转变成糖代谢的中间产物 生糖氨基酸 除Phe,Tyr,Leu,,lys,Trp外 α-酮酸 -NH2 甘油 α-磷酸甘油 磷酸二羟丙酮 乳酸 丙酮酸 2H ⑵ 上述糖代谢中间代谢产物进入糖异生途径,异生为葡萄糖或糖原 注意:乙酰CoA不能是糖异生的前体,它不能转化为丙酮酸,因为丙酮酸脱氢酶是不可逆的 脂肪酸-β-氧化产生的乙酰辅酶A,在肌肉中进入三羧酸循环,在肝肾细胞中还有另一条去路,就是生成乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮,这三者总称为酮体。 代谢定位: 生成:肝细胞线粒体 利用:肝外组织(心、肾、脑、骨骼肌等)线粒体 肝脏生成,肝外利用 75、酮体 * drdgthtrhtrj 2009年 * drdgthtrhtrj 非极性中性氨基酸 N H CH3 2 CH2 * drdgthtrhtrj 极性中性氨基酸 Cys, * drdgthtrhtrj 酸性氨基酸 * drdgthtrhtrj 碱性氨基酸 H2N-C-NH— = NH * drdgthtrhtrj 氨基酸小结 酸性氨基酸:天门冬氨酸Asp、谷氨酸Glu 碱性氨基酸:精氨酸Arg、赖氨酸Lys、组氨酸His 芳香族的(含苯环的):苯丙氨酸Phe、酪氨酸Tyr、色氨酸Trp * drdgthtrhtrj 36、蛋白质的变性与复性 变性剂 蛋白质空间构象破坏 生物学活性丧失 理化性质改变 加热、酸碱、有机溶剂、 尿素、盐酸胍、去污剂 易水解 易沉淀 蛋白质非共价键和二硫键破坏, 不涉及肽键 * drdgthtrhtrj 复性:去除变性因素,蛋白质恢复空间构象 与生物学活性的过程。 3.蛋白质的变性与复性 * drdgthtrhtrj 核糖核酸酶的变性与复性示意图 8M尿素或 β-巯基乙醇 透析 * drdgthtrhtrj 某些蛋白质在发生热变性后,松散的多肽链相互缠绕在一起,变成固体状态,称为蛋白质的凝固(coagulation)。 * drdgthtrhtrj 36、相关概念 透析:用透析袋(半透膜)把大分子和小分子分开的 方法。 离心:利用物质的大小、密度等方面的差异,用旋转所产生背向旋转轴方向的离心运动力使颗粒或溶质发生沉降而将其分离、浓缩、提纯和鉴定的一种方法。 盐析:高浓度中性盐使蛋白质从溶液中析出沉淀的方法(原理:破坏水化膜、中和电荷) 电泳:在电场中,带电颗粒向着与其带相反电荷的电极移动,这种现象称电泳 * drdgthtrhtrj 40、RNA介导的基因沉默 病毒基因、人工转入基因等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内,并利用宿主细胞进行转录时,常产生一些dsRNA。宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反应, ? * drdgthtrhtrj 40、RNA介导的基因沉默 其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA(大约21~23 bp),即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链,继之由反义siRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合,RISC具有核酸酶的功能,在结合部位切割mRNA,切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解,从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。 * drdgthtrhtrj siRNA不仅能引导RISC切割同源单链mRNA,而且可作为引物与靶RNA结合并在RNA聚合酶(RNA-dependent RNA p
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