尿蛋白检验.pptVIP

想一想 患者尿蛋白长期持续增高会有什么临床表现？ 谢谢！！ 混合性蛋白尿 肾脏病变累及肾小球和肾小管，由此产生的蛋白尿称为混合性蛋白尿 标题 1非选择性肾小球性蛋白尿伴游离轻链; 2肾小管性蛋白尿伴游离轻链 3生理性蛋白尿 4混合性蛋白尿 5选择性肾小球性蛋白尿 图1 SDS电泳图谱 肾后蛋白尿 组织性蛋白尿 在尿液代谢过程中，肾小管代谢产生的和肾组织破坏分解的蛋白，以及炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白（T-H） 偶然性蛋白尿 尿道炎、出血、混有阴道分泌物或精液 尿液化学检查（尿蛋白的检验） 河南科技大学第二附属医院 王善龙 尿液化学检查 尿液化学检验包括酸碱度、蛋白质、糖、酮体、胆色素、酶、激素等检查 pH、PRO、GLU、 KET 、BIL、URO 本节要点 了解尿液特殊化学检验的项目方法及临床意义 掌握尿液一般化学检验的原理 重点掌握尿液一般化学检验中蛋白、糖、酮体及三胆等的注意事项及临床意义 尿液蛋白质 尿液蛋白质检查 健康人尿中的蛋白质含量甚微（30~130mg/24h), 当尿液中蛋白质100mg／L或150mg/24h时,蛋白定性为阳性，称为蛋白尿 尿蛋白定性检测方法 加热乙酸法 磺基水杨酸法 干化学试带法 干化学法 ＰＨ指示剂蛋白质误差原理，1909年Soerensen发现 成分 主要酸碱指示剂溴酚蓝（ＰＨ阈值３.2） 柠檬酸缓冲系统 表面活性剂 1971年日本生产对白蛋白、球蛋白、本周氏蛋白均反应 1993年生产出免疫学方法 干化学法指示剂蛋白质误差原理 1909年Soerensen发现 3，3?，5，5′-四溴苯酚磺酰酞 尿蛋白试剂带组成及特性 试带法检测尿蛋白的干扰因素 仅作为过筛实验 不同ＰＨ对尿蛋白的影响 青霉素对蛋白质测定影响 大剂量青霉素滴注后对试带法测定尿蛋白的影响 ５～６h后检测尿蛋白 加热醋酸法测定尿蛋白 加热可使蛋白质变性凝固，加酸使蛋白质接近等电点，在含有适量无机盐的情况下，蛋白沉淀 标本要新鲜，陈旧尿液因大量细菌生长可引起假阳性,其他分泌物也可能出现假阳性 加酸过多或过少远离蛋白质等电点,可呈假阴性 无盐或低盐饮食的病人，因尿内电解质含量少，不利蛋白质沉淀，可致假阴性。可先加１-２滴饱和氯化钠液后再操作 严格按照加热＼加酸＼再加热程序，否则假阴性 加热乙酸法－－注意事项 磺基水杨酸法 试管法 玻片法 磺基水杨酸法--干扰因素 假阳性 尿液混浊 含有大量尿酸、尿酸盐、草酸盐 一些药物如大剂量青霉素、含碘造影剂、降血糖药可呈假阳性 混入生殖系统分泌物 假阴性 尿液过碱（PH9)或过酸（PH3) 大剂量青霉素滴注后对磺基水杨酸法测定尿蛋白的影响 尿蛋白定性实验方法学评价 在疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白含量的，建议使用磺基水杨酸（加热醋酸）和双缩尿法 对单纯球蛋白有特殊反应 尿液蛋白质的定量检验 比浊法 磺基水杨酸 三氯乙酸 钨酸 氯化苄甲乙氧胺 氯化苯甲烃胺 双缩脲法：经典方法 通过加酸于尿液中使蛋白质沉淀而形成一定的浊度 碱性环境下，蛋白质与季胺盐结合形成不溶性沉淀 染料结合法 直接法 考马斯亮蓝G-250 邻苯三酚红 染料和蛋白质结合时，其最大吸收峰发生漂移 沉淀法 丽春红S 苯胺蓝 蛋白质与结合的染料在TCA的作用下共沉淀。然后碱性环境使沉淀复溶，测定吸光度 免疫法 电泳法 尿液蛋白质定量检验方法评价 临床意义 定性试验（—） 定量试验：≤150mg/24h(100mg/L) 临床意义 生理性蛋白尿 功能性蛋白尿 直立性蛋白尿 摄入性蛋白尿 老年性蛋白尿 妊娠性蛋白尿 临床意义 病理性蛋白尿 肾前性蛋白尿 肾性蛋白尿 肾小球性蛋白尿 肾小管性蛋白尿 肾后蛋白尿 临床意义 肾前性蛋白尿溢出性蛋白尿 血液中低分子量蛋白质如血红蛋白、肌红蛋白、本周氏蛋白等增加超出肾小管重吸收能力 临床意义 肾性蛋白尿 肾小球性蛋白尿 选择性蛋白尿 非选择性蛋白尿 肾小管性蛋白尿 混合性蛋白尿 肾小球性蛋白尿 选择性蛋白尿 4~9万中分子量蛋白，以清蛋白为主 可见分子量接近的AT、Tf、PA ，α1-AG、α1-AT以及低分子量蛋白β2-M\FC片段等 不见分子量大的蛋白如IgG、 IgA、 IgM、C3 尿免疫球蛋白／清蛋白的比值0.1，尿蛋白+++~++++，定量3.5g/L 主要见于肾病综合症 肾小球性蛋白尿 非选择性蛋白尿 可见9万的蛋白如IgG、IgA、IgM、C3和中分子量以及小分子量蛋白β2-MG 免疫球蛋白／清蛋白比值0.5 尿蛋白+~++++，定量0.5~3g/L 多见于 原发性肾小球疾病：激进性肾炎、慢性肾炎、膜性或膜增生性肾炎 继发性肾小球肾炎：糖尿病、红斑狼疮 提示预后差 肾小管性蛋白尿 尿中蛋白以α1-M、β