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核酸提取测定及电泳分离一实验目的二实验原理根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离然后用蛋白质变性沉淀剂去除蛋白使核酸释放出来再利用核酸不溶于乙醇的性质将核酸析出达到分离提纯的目的三实验材料三实验材料四实验步骤五注意事项核酸含量测定实验原理加热条件下浓盐酸地衣酚绿色处有最大吸收酸二苯胺蓝色处有最大吸收试剂地衣酚试剂称取地衣酚溶于浓盐酸中再加入二苯胺试剂称取二苯胺经重结晶溶入冰醋酸中再加入浓摇匀标准液标准液实验步骤取三只试管编号加入如下图所示的试剂一实验目的决定在
核酸提取、测定及电泳分离; 一、实验目的 ; 二、实验原理 ; 根据核糖核蛋白（RNP）与脱氧核糖核蛋白（DNA）在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离，然后用蛋白质变性沉淀剂去除蛋白，使核酸释放出来，再利用核酸不溶于乙醇的性质将核酸析出，达到分离提纯的目的。 ;三、实验材料 ;三、实验材料 ;四、实验步骤 ;五、注意事项; 核酸含量测定;实验原理：
加热条件下：
RNA＋浓盐酸＋地衣酚 绿色（670nm处有最大吸收）
DNA＋酸＋二苯胺 蓝色（595nm处有最大吸收）;试剂
地衣酚（orcinol）试剂：称取100mg地衣酚溶于100ml 浓盐酸中，再加入100mgFeCl3·6H2O
二苯胺试剂：称取1g二苯胺（经重结晶）溶入100ml冰醋酸中，再加入2.75ml浓H2SO4摇匀。
RNA标准液（200μg/ml)
DNA标准液（400μg/ml)
;实验步骤：;取三只试管，编号，加入如下图所示的试剂：;;一 实验目的;决定DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素：;分离不同大小DNA片段应使用的琼脂糖凝胶浓度
琼脂糖（%） 分离DNA片段的有效范围（kb)
0.5 1-30
0.7 0.8-12
1.0 0.5-10
1.2 0.4-7
1.5 0.2-3
;实验材料
水平电泳槽及制胶模具
琼脂糖
电泳缓冲液
6×凝胶载样缓冲液
DNA样品
DNA Marker
DNA染料 溴化乙锭 / Gold view
紫外透射仪;琼脂糖;电泳缓冲液;凝胶上样缓冲液 （loading buffer）;DNA Marker ;溴化乙锭;四 实验步骤
1、稀释缓冲液的制备：用蒸馏水将5?TBE缓冲液配制成0.5?TBE稀释缓冲液.
2、胶液的制备：称取0.4g琼脂糖，置于200ml 三角烧瓶中，进入50ml的0.5?TBE稀释缓冲液，放入微波炉或电炉加热至琼脂糖全部熔化，取出混匀。在冷却至50~600C的琼脂糖胶液中加入EB溶液至终浓度为0.5?g/ml, 混匀。小心地倒入电泳槽中至一定高度。待胶液完全凝固后拔出梳子。然后向槽内加0.5?TBE稀释缓冲液至液面刚好没过胶板表面。;3、上样：在DNA样品混匀6?上样缓冲液，小心加到凝胶 空中。同时加DNA Marker作为对照。
4、电泳：从负极到正极，80-100V电泳40min。
5、观察：在波长为254nm的紫外透射分析仪下观察DNA电泳带并估计其分子量大小。
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