微生物学检验肠道杆菌概述PPT.pptVIP

肠道杆菌 是一大群生物学性状相近的革兰阴性杆菌。 与医学关系密切的肠道杆菌　 正常菌群 埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 肠杆菌属 沙雷菌属 枸橼酸菌属 致病菌 致病性大肠埃希菌 志贺菌属 沙门菌属 耶尔森菌属 肠道杆菌共同特性 形态染色：均为革兰阴性杆菌，无芽孢，有菌毛，多数有鞭毛，少数有荚膜 培养特性：需氧、兼性厌氧；营养要求不高；光滑型菌落； 生化反应： ☆氧化酶－；触酶＋；硝酸盐还原试验＋发酵葡萄糖 ☆非致病菌多数分解乳糖，致病菌多数不分解乳糖 抗原结构 ☆O抗原：化学成分为脂多糖；耐热；种属特异性；与相应抗体结合出现颗粒状凝集；共同抗原可引起交叉反应 ☆H抗原：化学成分为蛋白质；不耐热；与相应抗体出现絮状凝集 ☆表面抗原：化学成分为多糖；不耐热；可阻断O凝集 选择性平板的特点 均含有乳糖和酸碱指示剂： 　细菌分解乳糖产酸，使培养基pH降低，指示剂呈酸性变色，指示剂不同，菌落呈现不同的颜色。分解乳糖的细菌呈有色菌落，不分解乳糖的细菌为无色菌落 含有不同的抑制剂： 　对革兰阳性菌和非致病菌有不同程度的抑制作用，因此可以选择性的培养肠道致病菌。 选择平板细菌生长现象 双糖铁培养基（KIA） 配方：含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、硫代硫酸钠、硫酸亚铁、琼脂、酚红、乳糖1％ 、葡萄糖0.1％ 用途：主要用于观察肠杆菌科细菌是否分解乳糖、葡萄糖产酸产气、是否产生H2S。 KIA结果观察： 发酵葡萄糖：底层呈酸性反应（黄色），斜面为碱性反应（红色），若发酵葡萄糖产酸产气，底层同时有气泡 发酵葡萄糖和乳糖：底层和斜面均呈酸性反应（黄色） 产生H2S：培养基变黑 1.未接种细菌 3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性 （ AA＋－） 2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性（AA－－） 4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性 （KA－－） 5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性 （KA－＋） 微生物学检验 标本采集 　肠道标本：新鲜粪便 　肠外标本：根据感染部位不同采集不同　 　　　　　　标本 检验程序 粪 便 肠道选择培养基 可疑菌落 生化反应 血清学实验 结果报告 药敏试验 肠道标本 血平板、弱选择平板 肠道杆菌的生化反应鉴定 与其他科细菌鉴别： 鉴定试验 肠杆菌科 非发酵菌 弧菌科 氧化酶 － ＋ ＋ 葡萄糖氧化/发酵（O/F） F O／－ F 鞭毛 周鞭毛 单、丛、周 单、丛 初步分群 苯丙氨酸（－） 葡萄酸盐（－） 苯丙氨酸（＋） 葡萄酸盐（－） 苯丙氨酸（－） 葡萄酸盐（＋） 埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 沙门菌属 普罗威登斯菌属 肠杆菌属 志贺菌属 摩根菌属 沙雷菌属 枸橼酸菌属 哈夫尼亚菌属 爱德华菌属 耶尔森菌属 肠道杆菌属间鉴定 菌属 KIA MIU 斜面 底层 气体 H2S 动力 吲哚 脲酶 埃希菌属 A/K A ＋/- － +/- + - 志贺菌属 K A - － - +/- - 沙门菌属 K A + D/+ + - - 变形杆菌属 K A + +/－ + -/+ + 克雷伯菌属 A A + － - d + 微量生化反应系统鉴定 将细菌的多项生化反应的2进制数结果数，转换成8进制编码而汇集成册，丛编码的检索表中检索而确定细菌菌名． －＋－－＋＋＋－－－＋＋＋－－ 010011100011100 010　011　100　011　100 000　0 010　1 001　2 011　3 100　4 101　5 110　6　 111　7 1 3 4 3 4 肠道杆菌 埃希菌属 埃希菌属 种类 　大肠埃希菌 　蟑螂埃希菌 　弗格森埃希菌 　赫尔曼埃希菌 　伤口埃希菌 形态染色 革兰阴性短杆菌，多数有周鞭毛，有荚膜或微荚膜，有菌毛，均无芽孢 培养特性 兼性厌氧 营养要求不高 圆形光滑菌落 菌落特征 　SS平板－－红色菌落 　Mac平板－－红色菌落 　EMB平板－－紫黑色有金属光泽菌落 生化反应 氧化酶试验（－） 分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖等，（个别菌株迟分解乳糖或不分解乳糖） KIA：AA＋－ MIU：＋＋－ IMViC：＋＋－－ 抗原结构 抗原种类：O、H、K抗原 意义：表示大肠埃希菌血清型 血清型表示式：O:K:H 举例：O111:K58:H2 抵抗力 胆盐、煌绿对该菌有抑制作用 对氯霉素、链霉素、庆大霉素敏感，但易产生耐药性 临床意义 致病物质：K抗原、菌毛、内毒素、肠毒素（LT、ST） 所致疾病： 肠外感染：多为机会感染，表现为泌尿系感染（多见），胆囊炎、腹膜炎等 肠内感染：由致病大肠埃希菌引起，表现为腹泻。 微生物学检验 标本采集： 肠外感染：根据病变部位不同采集不同标本，如血液、尿液、分泌物等 肠内感染：采集新鲜粪便 检验程序 肠内感染