微生物学检验肝炎病毒及检验PPT.ppt

HBV基因结构 环状双股不完全闭合的DNA 长链有4个开放读码框架，分别为： S区 C区 P区 X区 长链 短链 DNA聚合酶 乙肝病毒的复制 乙肝病毒的三种颗粒 Dane颗粒 核心：双股不完全闭合的DNA 和DNA 聚合酶 内衣壳：20面立体对称 外衣壳：相当于病毒的包膜 Dane结构 HBV感染的分布 甲型肝炎病程 HAV体内过程 HAV电镜图 肝炎病毒 是引起病毒性肝炎的病原体 已知的肝炎病毒： 甲、乙、丙、丁、戊、己、庚型肝炎病毒 甲型肝炎病毒 是引起甲型肝炎的病原体 生物学形状 属肠道病毒72型 形态：呈球形 结构：直径27~32nm,单股正链RNA，无包膜 动物模型：黑猩猩对HAV易感 细胞培养：原代猕猴肝细胞、猴胚肾细胞，一般不产生细胞病变 抗原型别单一 抵抗力：抵抗力强，对乙醚 、酸、热等较稳定 致病性与免疫性 传染源：病人 传染方式：粪口途径 致病机制： 在肝细胞内增殖，不直接造成肝细胞损伤， 免疫病理作用导致肝细胞损伤 免疫性： 刺激机体产生抗HAV IgG和IgM 抗HAVIgG对再感染具有免疫力 微生物学检查 免疫电镜检测病毒颗粒 免疫学方法检测病毒抗原 检测抗HAVIgM是确诊甲型肝炎的依据 方法：ELISA法和放射免疫测定 PCR法：检测病毒核酸 检测抗HAVIgG主要用于流行病学调查 生物学形状 形态与结构 大球形颗粒:又称Dane颗粒，是完整的HBV 小球形颗粒:是病毒组装后过剩的衣壳蛋白 管形颗粒：由小球形颗粒串连而成 乙肝病毒的基因 短链：为正链，长度是长链的50％～100％ 长链：为负链，含HBV全部遗传信息 S区：编码HBsAg和前S1抗原和前S2抗原 C区：编码HBcAg和HBeAg P区：编码DNA 多聚酶 X区：编码HBxAg(可能与肝癌发生有关) 乙肝病毒的复制方式 吸附、穿入肝细胞 脱壳 转译外衣壳蛋白 转译内衣壳蛋白 前基因组 复制子代核酸 组装 释放 HBV的抗原组成 HBsAg: 以三种不同形式存在于患者血清中 HBsAg亚型的分布有明显地区差异,并与种族有关 血清HBsAg是感染HBV的重要标志 HBsAg刺激机体产生的抗-HBs是中和抗体,对机体有保护作用 关于前S1和前S2抗原 HBcAg 存在于Dane颗粒中 不易在血液中检出 可在感染的肝细胞表面存在 刺激机体产生抗-HBc（IgG、IgM） 血清抗-HBcIgM的检出，表明病毒在肝细胞中复制 HBeAg 存在于Dane颗粒中 游离存在于血液中 是病毒复制及强传染性的指标 产生抗－HBe，是预后良好的征象 突变株可不产生HBeAg HBV其他生物学性状 培养: ◆黑猩猩是HBV最敏感的动物模型 ◆细胞培养已获成功 抵抗力:强 ◆能耐受低温、紫外线、干燥和一般消毒剂100℃10分钟、高压蒸汽灭菌、0.5％过氧 乙酸等能使HBV灭活 传染源与传播途径 传染源：乙肝病人、无症状病毒携带者 传播途径：血液、血制品等途径传播母婴垂直传播 临床表现： 无症状携带者 急性乙肝 慢性乙肝暴发性肝炎 肝外表现：发热、皮疹、血管炎等 致病机制 细胞免疫介导的免疫损伤 免疫复合物性的免疫损伤：肝外损伤 自身免疫反应的免疫损伤 病毒变异：逃逸免疫 免疫性 抗-HBs：一般于感染后4～5月阳转，持续6个月或数年，是保护性抗体 抗-HBc：一般于感染后3～5周阳转，无保护作用，IgM可作为急性一干的诊断指标，IgG是HBV既往感染的指标 抗-HBe：一般在HBeAg消失时出现，是病情开始恢复的征兆 HBV诱导免疫应答对机体的双重作用 免疫保护作用 抗－HBS和抗前S对病毒的中和作用 CTL对细胞内病毒的清除作用 免疫损伤作用 肝细胞损伤 肝外损伤 机体免疫状态与HBV感染的转归 免疫功能正常－－隐性感染或急性乙肝，病毒被清除 免疫低下－－慢性乙肝 免疫过强－－暴发性肝炎 免疫耐受－－HBV无症状携带 HBV与原发性肝癌 流行病学方面 动物模型 病毒分子结构 微生物学检查 HBV抗原抗体系统的检测 HBV五项指标 HBsAg、抗HBs HBeAg、抗HBe 抗HBc HBV抗原抗体检测的应用 乙型肝炎的诊断 判断传染性 判断预后 筛选献血员 检测疫苗接种效果 流行病学调查 HBV抗原抗体检测结果的临床分析 HBsAg HBeAg 抗-HBs 抗-HBe 抗-HBc 结果分析 ＋ － －