粗毛栓菌漆酶cDNA的PCR扩增 论文.doc

本科生毕业设计（论文） 题　　目 粗毛栓菌漆酶cDNA的PCR扩增 姓　　名 学号 系 别 生命科学系 专　　业 生物科学 指导教师 职称 教授 年 月 日 教务处制 摘要： 本实验以粗毛栓菌作为出发菌，进行了漆酶cDNA的PCR扩增。以半纤维素为碳源，用高碳低氮培养基, 培养10d，收集菌丝体，提取总RNA，做RT-PCR。结果显示通过RT-PCR有两条cDNA片段被扩增出来。 关键词： 粗毛栓菌，漆酶cDNA，RT-PCR扩增 Abstract: Total RNA was extracted from Trametes gallica cultivated for 10 days in high C -low N medium. The result showed that two cDNA fragments was amplified by RT-PCR. Key words: Trametes gallica Fr., laccase cDNA, RT-PCR 指导教师评语： 该生认真查阅参考文献，实验方案设计合理，在规定时间内完成了预定任务，初步掌握了从事有关研究的基本实验技能，具备了一定的独立从事科学研究的能力，达到了本科生的培养目标。该文达到了学士学位论文水平。 指导教师签名： 年 月 日 论文等级： 系负责人（签章）： 年 月 日 系审核意见： 系公章： 年 月 日 填写说明 用蓝色或黑色墨水的钢笔（或签字笔）填写，书写要清晰、工整、规范，不得打印。 此表一式两份。一份装入学生档案；一份按此表、开题报告、中期检查表、成绩评定表、论文正文的顺序装订成册，留系存档。 目 录 摘要……………………………………………………………………………………………1 关键词…………………………………………………………………………………………1 Abstract………………………………………………………………………………………1 Key words…………………………………………………………………………………1 引言……………………………………………………………………………………………1 1 材料与方法………………………………………………………………………………2 1.1 主要仪器与试剂用品 …………………………………………………………………2 1.1.1主要仪器……………………………………………………………2 1.1.2主要试剂……………………………………………………………2 1.1.3主要用品……………………………………………………………2 1.2 菌株及培养方式………………………………………………………………………2 1.2.1菌株………………………………………………………………2 1.2.2培养基………………………………………………………………3 1.3 PCR引物………………………………………………………………………………3 1.4 总RNA的提取与检测…………………………………………………………………3 1.4.1 总RNA的提取………………………………………………………………………3 1.4.2 总RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳………………………………………………4 1.4.3 总RNA纯度与浓度的检测…………………………………………………………4 1.5 RT-PCR…………………………………………………………………………4 1.5.1 逆转录………………………………………………………………………………4 1.5.2 总 cDNA的PCR扩增……………………………………………………………4 1.5.3 PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳…………………………………………………5 2 结果与讨论……………………………………………………………………………… 5 2.1 总RNA电泳结果………………………………………………………………………5 2.2 总RNA纯度与浓度……………………………………………………………………5 2.3 PCR扩增结果……………………………………………………