酶联免疫吸附法与胶体金标法检测HBsAg的结果差异.docVIP

精品论文 参考文献 酶联免疫吸附法与胶体金标法检测HBsAg的结果差异 黄少敏（海南省文昌市人民医院检验科 571300） 【摘要】 目的：对比分析酶联免疫吸附法（ELISA）与胶体金标法检测HBsAg的结果差异。方法：对310例病人血标本分别用ELISA与胶体金试纸条检测HBsAg，并对阳性率进行比较，观察两种方法的结果差异。结果：310例标本用ELISA检测HBsAg，其中阳性30例，阳性率为9.68%；用胶体金标法检测，阳性28例，阳性率为9.03%。二者经chi;sup2;检验，显示差异无统计学意义。结论：两种方法均为检测HBsAg的有效方法，胶体金标法操作简单、快捷方便，可用于急诊及健康人群的筛查，并可与ELISA相互验证；ELISA适用于检验科常规检查。 【关键词】 酶联免疫吸附法 胶体金标法 HBsAg 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）11-0369-02 我国是乙型肝炎的高发区，乙肝病毒人群携带率大约为10%，主要通过血液传播、母婴传播和性接触传播，严重危害人类健康。目前，我国对乙肝病毒感染的诊断主要是检测患者血清中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg），采用最普遍的检测方法是酶联免疫吸附法（ELISA），其操作简便快速、灵敏度高、准确性好；胶体金标法是在ELISA基础上发展起来的一种检测技术，具有操作简便快捷、可单份检测、便于保存、不需特殊设备等优点，也广泛应用于HBsAg的初筛。本文对两种方法检测结果进行比较，探讨其差异性。 1 资料与方法 1.1 一般资料 我院2012年4月～6月健康体检人员310例，其中男性200例，女性110例，年龄19～53岁，平均年龄32.5岁。所有受检者均空腹采取静脉血3ml，待血液凝固后离心分离血清检测。 1.2 试剂 金标法试纸条由浙江杭州艾康生物技术有限公司提供；ELISA使用MK3型酶标仪，RT-3000洗板机，试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供，两种方法皆严格按照说明书及操作规程进行操作。 1.3 方法 310例标本均分为两份，分别用ELISA和胶体金标法检测HBsAg，并对检测结果进行比较。 1.4 结果判读 （1）胶体金标法：在层析扩散正常的情况下，仅在对照区出现紫红色条带结果为阴性，在检测区和对照区均出现紫红色条带结果为阳性，试纸条上对照区未出现紫红色条带结果无效。（2）ELISA：OD值ge;1为阳性，反之为阴性。 1.5 统计学分析 实验数据处理采用chi;2检验进行分析，P＜0.05为差异有统计学意义；Pgt;0.05，则差异无统计学意义。 2 结果 310例标本用ELISA检测HBsAg，其中阳性30例，阳性率为9.68%；用胶体金标法检测，阳性28例，阳性率为9.03%。二者经chi;2检验，显示差异无统计学意义。具体结果见表1。 表1 ELISA和胶体金标法检测HBsAg结果比较 注：两种方法比较，Pgt;0.05，差异无统计学意义。 3 讨论 乙型病毒性肝炎是一种严重危害人群健康的传染病，乙肝病毒感染是全球性公共卫生问题。我国是乙肝病毒感染的高发区，约有1亿人为HBsAg携带者，现患慢性乙型肝炎患者多达1000万人，防治任务十分艰巨。因此一个准确、快速的检测方法十分重要。 目前国内检测HBsAg常用方法有ELISA和胶体金标法。ELISA的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度[1]。胶体金法以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如层析一样。液体流经干片下端时使干片上的免疫金复合物复溶，并带动其向膜条渗移。若标本中有待测特异抗原，其时可与免疫金复合物之抗体结合，此抗原抗体复合物流