骨髓间充质干细胞治疗大鼠骨关节炎的实验研究精选.pdfVIP

北 京 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) JOURNALOFPEKINGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES) Vo1．47 No．2 Apr，2015 论 著 骨髓问充质干细胞治疗大鼠骨关节炎的实验研究 崔云鹏，曹永平 ，刘 恒，杨 昕，孟志超，王 瑞 (北京大学第一医院骨科 ，北京 100034) [摘 要]目的：研究不同浓度骨髓间充质干细胞 (bonemarrowmesenchymalstemcells，BM—MSCs)对骨关节炎 (oste— oarthritis，OA)的治疗效果 ，并探究其治疗机制。方法：8周龄近交系SD大鼠32只随机分成4组 ，每组8只，均采用 自身双侧对照研究：对照组、高浓度组 (1×10／mLBM—MSCs)、低浓度组 (5×10／mLBM—MSCs)及高／低浓度对 比 组。应用改 良Huhh方法诱导膝关节OA。对照组一侧行手术 ，另一侧行假手术 ，其余各组均行双侧手术。术后 4 周处死对照组大鼠采集双侧膝关节标本。各试验组大鼠膝关节 内注入相应浓度的BM—MSCs或磷酸盐缓冲液 (phosphatebufferedsolution，PBS)，切断大鼠双侧坐骨神经及股神经使下肢制动，注射3周后处死各组大 鼠并收取 双侧膝关节标本。应用 Mankin组织学评分评价OA病变程度 ，RT．PCR检测软骨 Ⅱ型胶原mRNA表达，荧光显微 镜观察荧光蛋白标记的BM—MSCs在膝关节 内分布情况。结果：高浓度组、低浓度组 BM—MSCs侧软骨组织标本 Mankin评分均明显低于对照侧 (5．40．4-0．51 ．9．60±0．51；6．60-i-0．40vs．10．00±0．32；P均0．05)，高／低浓度 对比组高浓度侧 Mankin评分略低于低浓度侧 (6．40±0．51ys．7．60±0．75，P0．05)。RT-PCR结果显示，高浓度 组、低浓度组BM-MSCs侧软骨 Ⅱ型胶原 mRNA含量分别为对照侧的108％±1％和 106％ ±l％，高／低浓度对比组 高浓度侧 Ⅱ型胶原mRNA含量是低浓度侧的102％±1％。荧光显微镜显示，在软骨表面未见绿色荧光蛋白表达， 而在滑膜组织内可见绿色荧光表达。结论 ：关节腔内注入BM-MSCs可能通过间接机制对OA软骨病变起到保护作 用，两种浓度治疗效果无差异。 [关键词]骨关节炎；间充质干细胞；注射，关节内 [中图分类号]R684．3 [文献标志码]A [文章编号]1671-167X(2015)02-0211-08 doi：10．3969／j．issn．1671—167X．2015．02．005 Bonemarrow mesenchymalstem cellsinSprague-Dawleyratmodelofosteoarthritis CUIYun—peng，CAOYong．ping ，LIU Heng，YANG Xin，MENGZhi—chao，WANG Rui (DepartmentofOrthopaedics，PekingUniversityFirstHospital，Beijing100034，China) ABSTRACT Objective：Toinvestigatetheemcacyofsingletimeintra．articulardifferentconcentrationof allogeneicbonemarrow mesenchymalstem cells (BM—MSCs)iniection inthetreatmentofSprague— Dawley(SD)ratmodelofosteoarthritis(0A)．Methods：Inthestudy，32SDratswereequallyran— domizedinto4groups：controlgroup，highconcentrationgroup(1×10／mLBM-MSCs)，lowconcentra- tiongroup (5×10。／mLBM—MSCs)andhighvs．1ow concentrationgroup．Thetwokneesofeachrat weresetuptoapair．TheinductionofOA wasperformedsurgicallyrandomlyatonesideinmodelgroup． andbilaterallyin