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浅谈DNA甲基化与乳腺癌 表观遗传学 表观遗传学( epigenetics)是指无序列改变的DNA 或染色体因修饰作用引起的基因表达改变, 它发生在DNA 复制后的转录或mRNA 的翻译过程, 并且能在细胞增殖过程中稳定传递。表观遗传主要涉及DNA 甲基化、染色质重塑、基因组印记和非编码RNA 的基因表达调控等。 DNA甲基化 DNA 甲基化是表观遗传学研究最深入的一种机制。DNA 甲基化是指由DNA 甲基转移酶( DNMT) 催化，将活性甲基从S-腺苷甲硫氨酸转移至胞嘧啶的C 5 位上，形成5-甲基胞嘧啶的化学修饰过程，是一种表观遗传修饰。 DNA甲基化 超甲基化 低甲基化 去甲基化 超甲基化 发生在DNA 启动子区CpG 岛的超甲基化是最主要的表观遗传学改变,DNA 超甲基化使抑癌基因表达沉寂, 失去抑制细胞异常增殖和转移的功能,多种抑癌基因启动子区的超甲基化与乳腺癌的进展和转移相关。 低甲基化相关基因 尿激酶 (uPA) 核突触蛋白-C (SNCG) 去甲基化  DNA甲基化是靠DNMT来维持，目前去甲基化药物主要指DNMT抑制剂，它通过抑制DNMT来恢复抑癌基因的功能，从而达到治疗肿瘤的目的。DNMT抑制剂治疗肿瘤的作用机理： 正常组织在某些因素的作 用下转化为恶性肿瘤时，抑 癌基因也经历着从正常表达、 启动区未甲基化到基因沉默、启动区高甲基化的转变，DNMT在这一转变过程中的作用有二，一 是激活启动区从未甲基化到 高甲基化，二是使之在每 一轮DNA复制以后仍保 持着高甲基化状态。 去甲基化药物通过抑 制DNMT的活性使复制后的 DNA不能再次甲基化，这就 导致所有等位基因表现为去甲 基化，从而使抑癌基因得以恢 复、重新抑制肿瘤的生长。 DNA去甲基化治疗药物 1.核苷类DNMT抑制剂，如5-氮胞苷及其脱氧核糖类（具有很强的甲基化抑制作用，第一个被美国FDA批准上市治疗恶性肿瘤的去甲基化药物，主要用于骨髓增生异常综合征，还可用于白血病）； 2.非核苷类弱DNMT抑制剂，如肼屈嗪，普鲁卡因等（较弱的去甲基化作用，限制了其临床应用）； 3.自行设计的抑制剂，如RG108（直接并特异性地作用于DNMT） DNA去甲基化的药物治疗对血液学方面的肿瘤疗效好，而对实体肿瘤则不像预期的那样有效，可能的原因是药理学及药代学方面的机制不同，其他原因： DNMT有3种，它们之间 存在协同作用，需同时 抑制几种DNMT才能为 临床治疗带来最佳疗效 发挥作用的前提是 细胞DNA合成处于旺盛期， 对于增殖低下的细胞如肿 瘤干细胞不敏感 DNA甲基化和组蛋白乙酰化酶抑制剂联合使用，如5-氮胞苷和丁酸苯酯、地西他滨和丙戊酸联合用药。 DNA甲基化检测方法 传统的整体水平甲基化分析方法：如高效液相色谱柱及相关方法、SssI甲基转移酶法、免疫化学法、氯乙醛法； 特异性位点的DNA甲基化检测：如甲基化敏感性限制性内切酶、直接测序法等。 定量多重甲基化特异性PCR(QM-MSP)是一种特异位点甲基化检测技术。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变。因此从理论上讲,用不同的引物PCR,即可检测出这种差异,从而确定基因是否有CpG岛。 DNA 甲基化在乳腺癌早期诊断中的应用 经研究证实，结肠腺瘤 性息肉病( APC) 基因在 原位癌和不同分期的乳腺 癌均有甲基化发生，而在非乳腺癌组织中甲基化发生频率很低，这对早期乳腺癌的诊断有一定临床意义。 Cyclin D2 甲基化几乎只在 乳腺癌组织中出现，并且 可以在血清或乳头抽吸 液中进行检测，这有 可能作为乳腺癌早 期诊断的标志应 用于临床。 DNA 甲基化与乳腺癌的治疗 DNA 甲基化导致的基因失活 与基因突变或缺失不同，它不改变 DNA 序列，因此改善其甲基化状态有 可能使基因恢复表达，这也为肿瘤 的治疗提供了新思路。 DNA 甲基化与乳腺癌的治疗 ER 的表达与否是预测乳腺癌内分泌治疗敏感性的标 志 物。迄今为止，未发现ER 基因的遗传学改变 (如同源缺失、LOH、基因突变等) 对ER 表 达缺失起作用。 有研究表明，在中国的原发性乳腺癌 患者中，ERα 基因启动子区甲基化是导