免疫组化与细胞形态学研究PPT.ppt

免疫组化与细胞形态学研究;免疫组织细胞化学 （理论10学时、实验30学时） ;参考书：; ;组织学: 体内结构为立体的，三维的，而课本、讲义和显微镜下的结构均为平面的，二维的。; 肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色 b. 如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同，该结构具有异染性(Metachromasia)。 c. 如果某结构能将银离子还原成银原子，并吸附银原子而使自身显示棕黑色，该结构具有嗜银性(Argyrophilic)。; HE染色的中等动静脉 d. 不同的染色方法，其结果不同。;醛复红染色的中等动静脉;网状纤维具有嗜银性，因此可以用银盐染色来显示。; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;三、免疫组织化学的发展简史;A cell-labeling technique called DiOlistics,invented by postdoctoral fellows Wen-Biao Gan, PhD, and Jaime Grutzendler, PhD, and faculty members Rachel O.L. Wong, PhD, and Jeff W. Lichtman, MD, PhD -- distinguishes individual cells in the brain using seven different colors. ;Stylonychia mytilus;AZM、UM、FC;Stylonychia mytilus;Paramecium caudatum;Paramecium caudatum;Stylonychia mytilus;四、免疫组织化学的优点及应用; ; ; ; ; ; ; ;生物素; ; ; ;第三节 组织细胞的处理;第三节 组织细胞的处理; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;第三节 组织细胞的处理; ; ;（三）浸蜡与包埋过程中的注意事项;第三节 组织细胞的处理; ; ; ; ; ; ; ;第四节 免疫组化染色的原理及方法; ; ; ; ;2.间接法;2.间接法;因信号被放大，因此更加敏感。 应用：常用; ; ; ;激光扫描共聚焦显微镜; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;PAP复合物稳定，不易脱落，灵敏度高。; ; ;LAB法反应原理：抗原+一抗+生物素标记的二抗+酶标抗生物素+DAB-H2O2显色液; ;; ;ABC法反应原理：抗原+一抗+生物素标记的二抗+ABC复合物+DAB-H2O2显色液; ; ; ;六、对照的设置 ;六、对照的设置 ;六、对照的设置 ;六、对照的设置 ; ; ; ; ; ; ; ; ;3.实验方法;3.实验方法;;3.实验方法;3.实验方法;3.实验方法; ; ; ; ; ; ; ; ;在预先用明胶处理过的载玻片一端滴二滴经煮沸去气泡的蒸馏水。 用小镊子夹取一段蜡带，使浮在玻片的水上，摆正位置（一般稍偏于玻片的一端，留下贴标签位置）。 然后把玻片放在展片台上，蜡带受热即自动展开，也可用解剖针轻轻拉开。 倾斜载片，用吸水纸吸去多余水分。注意切片和载玻片之间不能有气泡，否则在展片时气泡会扩大，影响以后镜检。 ;; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;2.实验材料; ; ; ; ; ; ; ; ;;; ;;1.实验设计： 用ABC法检测家鸡消化道内5-HT细胞的分布，要求写出详尽合理的实验设计方案（包括详细的时间安排，用品试剂准备情况等）;一、包埋 每人包埋一个蜡块 二、切片 每人贴五张片子备用 三、染色 每人上交一张染好的装片 ;1.实验设计： 用ABC法检测家鸡消化道内5-HT细胞的分布，要求写出详尽合理的实验设计方案（包括详细的时间安排，用品试剂准备情况等）