5-分子生物学d核酸.pptVIP

3. 反竞争性抑制 　　抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物结合，使ES的量下降 反竞争性抑制 抑制作用的类型 不可逆性抑制 可逆性抑制 ： 竞争性抑制 (competitive inhibition) 非竞争性抑制 (non-competitive inhibition) 反竞争性抑制 (uncompetitive inhibition) DNA复制、损伤与修复 第四节 1.DNA复制 DNA复制依赖于特殊的碱基配对 碱基互补配对原则 A＝T G≡C DNA复制是半保留式的 1953年，Watson Crick 提出 DNA复制发生在细胞分裂周期的S期 ? DNA双螺旋在解旋酶的作用下解旋，2条链中间的碱基对分开，成为2条单链；每一条单链都作为模板； ? 每条链上暴露出来的碱基各自与一个游离于核中的4种三磷酸脱氧核苷酸（T、G、A、C）按照碱基配对原则配对，形成与之互补的核苷酸； DNA半保留式复制： 在与单链上配对的核苷酸之间形成磷酸二酯键，在DNA聚合酶的作用下形成链条新的互补链（子链），其中DNA聚合酶只能使核苷酸按5’ 3’ 方向连接。 最终形成各含一条母链和一条子链的2个双链DNA分子。 DNA半保留式复制： 半保留模型 DNA聚合酶和冈崎片段（半不连续复制） DNA聚合酶的共同特点： （1）需要提供合成模板；需要Mg 2＋ 催化； （2）不能起始新的DNA链，必须要有引物提供 3’-OH； （3）合成的方向都是5’→3’ （4）除聚合DNA外还有其它功能。 而DNA母链（模板链）方向为5’→3’和3’→5’，如何解决这一矛盾？ DNA聚合酶和冈崎片段（半不连续复制） 冈崎片段与半不连续复制模型 在5’→3’ 这一模板上，DNA聚合酶仍按照5’→3’方向先反方向地合成一系列小的片段，称为冈崎片段 然后这些小片段再通过DNA连接酶的作用，互相连接起来而成长链。 3 Polymerase III 5’ ? 3’ 前导链 Leading strand base pairs 5’ 5’ 3’ 3’ Helicase ATP 单链结合蛋白 SSB Proteins RNA引物 RNA Primer 引物酶primase 2 聚合酶III Polymerase III 滞后链 Lagging strand 冈崎片断Okazaki Fragments 1 RNA primer replaced by polymerase I gap is sealed by ligase 连接酶 Summary：DNA复制过程模式图 1）原材料：双链DNA（模板），核苷酸（底物）； 2）辅助条件：解旋酶，单链结合蛋白，DNA聚合酶，引物酶，DNA 连接酶 * 核酸 長鏈的記錄法，當然不能每次都把整個構造寫出來。方便的筆記法是把核糖變成一直線 (R)，從上到下分別是 1’ → 5’，而 1’ 接有鹼基 (B)，5’ 接有磷酸 (P)；各核苷酸間以斜線表示磷酸二酯鍵。 後來覺得這樣還是很麻煩，就省去直線及斜線，以 p 代替雙磷酯鍵，只留下各個不同的鹼基序列，最後又去掉鹼基間的 p；有時特別標出 5’ 及 3’ 端，以作為提醒，因為核酸的方向性極為重要。 * * * * * * * * 酶与一般催化剂的共同点 在反应前后没有质和量的变化； 只能催化热力学允许的化学反应； 只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平衡点。 （一）酶促反应具有极高的效率 一、 酶促反应的特点 酶的催化效率通常比非催化反应高108～1020倍，比一般催化剂高107～1013倍。 酶的催化不需要较高的反应温度。 酶和一般催化剂加速反应的机理都是降低反应的活化能(activation energy)。酶比一般催化剂更有效地降低反应的活化能。 反应总能量改变 非催化反应活化能 酶促反应 活化能 一般催化剂催 化反应的活化能 能 量 反 应 过 程 底物 产物 酶促反应活化能的改变 活化能：底物分子从初态转变到活化态所需的能量 一种酶仅作用于一种或一类化合物，或一定的化学键，催化一定的化学反应并生成一定的产物。酶的这种特性称为酶的特异性或专一性。 * 酶的特异性(specificity) （二）酶促反应具有高度的特异性 根据酶对其底物结构选择的严格程度不同，酶的特异性可大致分为以下3种类型： 绝对特异性：只能作用于特定结构的底物，进行一种专一的反应，生成一种特定结构的产物 。 相对特异性：作用于一类化合物或一种化学键。 立体结构特异性：作用于立体异构体中的一种。 绝对特异性 　　酶只作用于特定结