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现代动物生物化学 酶的动力学问题-2 三、多底物的酶反应 A + B P +Q 顺序无规则 （sequential random） 底物A、B与酶的结合孰先孰后无规则，产物P、Q从酶上脱离 孰先孰后也无规则 肌酸激酶催化的反应 顺序有规则 （ordered ） 底物A 、B与酶的结合以及产物P、Q从酶上脱离都是依次进行的 乳酸脱氢酶催化的反应 乒乓机制 （ping-pong mechanism ） 酶一次只结合一个底物，只有当第一个产物离开酶之后， 才结合第二个底物，如此一来一往 谷草转氨酶催化的反应 四、可逆酶反应的抑制动力学 在可逆的竞争性抑制中，抑制剂通常是酶的天 然底物结构上的类似物，两者竞争酶的活性部位。 举例，细菌的叶酸合成酶 竞争性抑制的动力学特点是Vm不变，而Km增大, 反应 体系中存在二元复合物ES和EI 竞争性抑制的双倒数作图 在可逆的非竞争性抑制作用中：抑制剂结合在活 性部位以外；抑制剂的结合阻断了反应的发生。 非竞争性抑制作用的动力学 特点是Vm变小，而Km不变, 反应体系中存在ESI三元复合物。 非竞争性抑制的双倒数作图 注意 竞争性和非竞争性两种抑制作用的动力学公式 习 题 1. 某个酶符合米氏动力学。请问：当酶的80%被底物饱和时， [ Ｓ]与Km 的关系如何？ 答案：[ Ｓ] =4Km 2. 已知某海洋微生物的葡萄糖-6-硫酸 （G-6-S ）酶的Km = 6.7 x 10-4 mol/L，Vm = 300μmol/L min-1 ，半乳糖-6-S （Gal-6-S） 是其竞争性抑制剂。在Gal-6-S 为10-5 mol/L和G-6-S 为2 x 10- 5 mol/L 同时存在时，v = 1.5μmol/L min-1 ，求：半乳糖-6-S 的Ki 值。 （提示：竞争性抑制剂存在时，酶的Vm不变，而Km变大， 因此可以求出在有抑制剂存在时酶的表观Km 。） 答案：Ki = 2 x 10-6 mol/L 五、变构酶的动力学 变构酶 （allosteric enzyme ） 变构酶通常是多亚基的，是代谢途径的关键酶或限速酶， 催化代谢途径中的非平衡反应，或称不可逆反应。这些酶 一般处在途径的开始阶段或分支点上，通过反馈控制 （feedback ）调节。 调节亚基与催化亚基分开，彼此独立的，称异促变构。 变构剂与底物结合在同一个亚基上，称同促变构。 变构酶有特征性的S形动力学曲线。变构剂或底物浓度， 在一定的范围里，一个比较小的变化就会导致反应速度显 著的改变，因此更具可调节性。 米氏双曲线与S形变构曲线 变构酶模型 一个反馈控制和异促变 构的例子 天冬氨酸转氨甲酰基酶 （ATCase ）是嘧啶核苷酸 合成途径的限速酶。Asp 是这反应的底物之一，终 产物是CTP 。 ATCase 由分开的催化 亚基 （c ）和调节亚基 （r ） 组成, 其天然结构是c r ； 6 6 经化学处理后，离心得到 r 和c ，可见这个酶的亚 2 3 基是由两个c三聚体 （2 c3