基因检测在临床使用华法林的应用方法PPT.ppt

* * 基因 * * DNA 与染色体结构 DNA 分子 (chromosome) 碱基 A T G C DNA碱基就这四个，RNA还有个U 不同的排列组合 产生千变万化的蛋白质 类似生命的密码 * * 蛋白质 2 蛋白质 1 非编码区 非编码区 基因 1 编码区 基因 2 编码区 * * 二. 基因是如何工作的？ 基因通过它们所编码的蛋白质决定人体的特征，包括人体如何应对环境带来的挑战。 * * 基因到蛋白质 I DNA TACGCAATATGCATT AUGCGUUAUACGUAA mRNA 这就是基因序列 我们测序测得就是这些 碱基排列顺序 1.严格一一对应 2.DNA把遗传信息转给信使RNA * * 基因到蛋白质 II 氨基酸 Lysine side chain 20 种不同的氨基酸 Basic Structure of an Amino Acid Graphic Representation of an Amino Acid Lysine Carboxyl group Amino group 每个氨基酸可对应mRNA上的3个碱基——“翻译” * * Ribosome mRNA tRNA A Codons: AUG=Methionine=Start CGU=Arginine UAU=Tyrosine ACG=Threonine UAA=Stop Methionine Arginine Threonine Tyrosine U G C G U U A U A C U A A G Stop Tyrosine Methionine Threonine Arginine 基因到蛋白质 III * * 蛋白质折叠与功能 Amino acid chain grows and folds into a 3-D structure. 所以控制某些生化反应的关键酶的基因变了，可导致这些关键酶的活性改变（大多是活性下降），进而使得相关的生化反应进度发生改变。 基因决定蛋白质 大多数酶就是蛋白质 酶起催化生化反应的作用 * * 三. 基因是如何引发疾病的？ 一个人的健康依赖于上千个蛋白质持续共同作用，在正确的地方以正确的数量一起发挥作用。 * * 当基因发生突变，基因所编码的蛋白质变得不正常。某些蛋白质改变是不重要的，而其它则可能会带来严重后果。 基因 突变 异常蛋 白质 * * 单核苷酸多态性（SNP）是最常见的基因变异 至少1%的人群 绝大多数人群 共有序列 G to C SNP 位点 变异的序列 四. 最常见的基因变异 SNP * * SNPs 与癌症风险 癌症病人 正常人群 这个人的癌症风 险比正常人群高 =10个人,SNP B =10个人,SNP A 目录 1.通常临床中是如何使用华法林的 2.基因检测技术 3.基因检测对临床使用华法林的意义 CYP2C9 华法林体内代谢的关键酶 CYP2C9占P450酶总量的20%，仅次于CYP3A。 基因全长55kb，含9个外显子和8个内含子。 CYP2C9基因具有多于50多种单核苷酸多态性，最常见的等位基因型是CYP2C9*1型（野生型）、CYP2C9*2型和CYP2C9*3型。 华法林的药动学 S-华法林的活性为R-华法林的3倍以上。 S-华法林主要由CYP2C9代谢，其代谢产物仅有微弱的抗凝作用。 CYP2C9酶活性下降会导致华法林在体内的清除减慢。 VKORC1 维生素环氧化物还原酶复合体 1，基因全长约11kb，有3个外显子，2个内含子。 VKORC1基因可分为A、B两组单体型，A组与华法林低剂量相关，B组与高剂量相关。 亚洲人中A组单体型的频率高达85％- 89％ SNP包括：内含子1173CT和5’上游区的-1639GA 目前研究已经证实一1639GA和1173CT两个位点是完全连锁的 -1639A=1173T=华法林低剂量 -1639G=1173C=华法林高剂量 华法林的药效学 通过抑制维生素K在肝脏细胞内合成凝血因子F2、F7、F9、F10，从而发挥抗凝作用。 体内环氧型维生素K被还原为氢醌型维生素K由维生素环氧化物还原酶复合体（VKORC）完成，华法林主要是抑制该酶而产生作用。 VKORC1基因突变导致其对华法林的敏感性发生变化。 基因检测指导华法林用药 CYP2C9：与野生型CYP2C9代谢酶相比，该酶的基因多态性已经被认为与小剂量华法林引起较高的出血并发症的发生率相关[1]。 VKORC1：华法林的作用靶点，VKORC1的基因多态性已显示出对华法林的治疗效果有很大影响[2,3]。 Caldwell MD , Berg RL , et al . Evaluation of genetic factors for warfa